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Invitrogen™ Kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ Promotorless Gateway™

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Code produit 17163029 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur A11146

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Le kit de vecteur ViraPower HiPerform Promotorless Gateway contient le vecteur d’expression lentivirale promotorless multisites ViraPower HiPerform et adapté à Gateway, pLenti6.4⁄R4R2⁄V5-DEST, pour un clonage et une expression aisés basés sur la recombinaison, d’un gène cible dans la division et la non-division des cellules de mammifères.

Le kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ sans promoteur Gateway™ contient le vecteur d’expression lentivirale sans promoteur adapté à MultiSite Gateway™ ViraPower™ HiPerform™, pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ pour un clonage facile basé sur la recombinaison et une expression de haut niveau et lentivirale d’un gène cible depuis le promoteur de votre choix dans la division et la non-division des cellules de mammifères. Le vecteur pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ est équipé de deux éléments génétiques clés, ce qui en fait un vecteur HiPerform™ : l’élément réglementaire post-transcriptionnel de la marmotte (WPRE) et la séquence centrale du tractus polypurin (cPPT) du gène de l’intégrase VIH-1 pour produire au moins 4 fois plus d’expression protéique par rapport aux vecteurs dépourvus de ces éléments.

Avantages
• Génère un lentivirus incompétent pour la réplication afin de transducter les cellules de mammifères de division et à non-division
• Clonage facile et simultané basé sur la recombinaison de plusieurs fragments d’ADN dans un ordre et une orientation définis à l’aide de la technologie Multisite Gateway™
• Expression du gène cible sous le contrôle du promoteur de votre choix
•Expression stable à long terme
• Expression protéique améliorée, jusqu’à 4 fois ou plus, par rapport aux systèmes d’expression lentivirale traditionnels

Principales caractéristiques
• WPRE du virus de l’hépatite de la marmotte, augmente l’expression transgénique et la cPPT du gène de l’intégrase VIH-1, augmente le nombre de copies de lentivirus s’intégrant dans le génome hôte, augmentant ainsi le titre viral. Le WPRE et la cPPT permettent ensemble de multiplier au moins par quatre l’expression protéique dans la plupart des types de cellules par rapport aux autres vecteurs dépourvus de ces éléments.
• Vecteur sans promoteur pour exprimer le gène cible sous le contrôle du promoteur de votre choix
• Marqueur de sélection de la blasticidine pour une sélection stable sous le contrôle du promoteur PGK pour une expression persistante à long terme

Le kit comprend
• Kit de clonage pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ Kit
• pENTR™ 5’ TOPO™ TA (réf. K59120)
E. coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ (réf. C737303)
• Plasmide de contrôle positif pENTR™ Gus

À des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques.
TRUSTED_SUSTAINABILITY

Spécification

Système constitutif ou inductible Constitutive
Type de livraison Lentiviral
Accélérateur Aucun (sans promoteur), EF-1α, CMV
Type de produit Kit de vecteur
Agent de sélection (eucaryotique) Blasticidine
Contenu et stockage Contenu
Le kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ sans promoteur Gateway™ comprend les composants suivants :

• Le kit pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ qui comprend :
  • 6 µg de vecteur pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ (40 µl de vecteur à 150 ng / µl dans le tampon TE, pH 8,0)
  • 10 µg de vecteur pLenti6.4 / CMV / V5-MSGW / lacZ (20 µl de vecteur à 0,5 µg / µl dans le tampon TE, pH 8,0)
  • 10 µg de plasmide pENTR 5’ / CMVp (20 µl de plasmide à 0,5 µg / µl de tampon TE, pH 8,0)
  • 10 µg de plasmide pENTR 5’ / EF1αp (20 µl de plasmide à 0,5 µg / µl dans le tampon TE, pH 8,0)

  • • Le kit de clonage pENTR 5’ TOPO™ (réf. K95120) contenant :
  • Réactifs pENTR 5’ TOPO™
  • E. coli chimiquement compétent One Shot™ TOP10 (réf. C404003)
  • E. coli One Shot™ Stbl3™ chimiquement compétente (n° de réf. C737303) : 21 x 50 µl de cellules Stbl3™, 6 ml de milieu S.O.C. et 50 µl d’ADN de contrôle pUC19 (10 pg⁄µl)
  • Plasmide témoin positif Gus pENTR™

  • Stockage
    • Kit pLenti6.4 / R4R2 / V5-DEST™ : -20°C
    • Réactifs pENTR™ 5’ TOPO™ : -20°C
    • E.coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ : -80°C
    • E.coli One Shot™ TOP10 chimiquement compétente : -80°C
    • Contrôle positif pENTR™ Gus : -20°C
    Résistance aux antibiotiques des bactéries Ampicilline (AmpR), blasticidine (BsdR)
    Clivage Aucun site de clivage
    Enzyme Gateway LR Clonase™ II Plus, LR Clonase™ II
    Enzyme de PCR Polymérase à activité corrective
    Position du marqueur de protéine (sur votre gène) C-terminal
    Origine de la réplication Origine pUC
    Promoteur du marqueur de sélection Promoteur PGK
    Marqueur de sélection eucaryotique BsdR
    Éléments spéciaux WPRE, cPPT
    Marqueur de protéine Étiquette d‘épitote V5
    Méthode de clonage Gateway™
    Quantité 20 réactions
    Vecteur pLenti
    Gamme de produits Gateway, HiPerform, ViraPower
    À utiliser avec (application) Clonez votre propre promoteur, expression virale
    Afficher plus Afficher moins

    Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

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