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Invitrogen™ Kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™
Description
Le kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™ contient le vecteur d’expression lentivirale régulé par tétracycline adapté à Gateway™ ViraPower™ HiPerform™, pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ pour un clonage facile basé sur la recombinaison et une expression de haut niveau régulée et lentivirale, d’un gène cible dans la division et la non-division des cellules de mammifères. Le vecteur pLenti6.3⁄ TO⁄ V5-DEST™ est équipé de deux éléments génétiques clés, ce qui en fait un vecteur HiPerform™ : l’élément réglementaire post-transcriptionnel de la marmotte (WPRE) et la séquence centrale du tractus polypurin (cPPT) du gène de l’intégrase VIH-1 pour produire au moins 4 fois plus d’expression protéique par rapport aux vecteurs dépourvus de ces éléments.
Avantages
• Génère un lentivirus incompétent pour la réplication afin de transducter les cellules de mammifères de division et à non-division
• Clonage facile basé sur la recombinaison à l’aide de la technologie Gateway™
• Expression stable, à long terme, régulée par la tétracycline
• Expression protéique améliorée, jusqu’à 4 fois ou plus, par rapport aux systèmes d’expression lentivirale traditionnels
Principales caractéristiques
• WPRE du virus de l’hépatite de la marmotte, augmente l’expression transgénique et la cPPT du gène de l’intégrase VIH-1, augmente le nombre de copies de lentivirus s’intégrant dans le génome hôte, augmentant ainsi le titre viral. Le WPRE et la cPPT permettent ensemble de multiplier au moins par quatre l’expression protéique dans la plupart des types de cellules par rapport aux autres vecteurs dépourvus de ces éléments.
• Promoteur hybride composé du promoteur du cytomégalovirus humain (CMV) et de deux sites d’opérateurs de tétracycline 2 (TetO2) pour une expression de haut niveau régulée du gène cible
• Marqueur de sélection de la blasticidine pour une sélection stable sous contrôle du promoteur SV40
Le kit comprend
• Le vecteur pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ vector
• pLenti3.3⁄TR
• Le plasmide pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZ
• Tetracycline
• E. Coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ (réf. C737303)
• Plasmide de contrôle positif pENTRTM Gus.
À des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques.
Avantages
• Génère un lentivirus incompétent pour la réplication afin de transducter les cellules de mammifères de division et à non-division
• Clonage facile basé sur la recombinaison à l’aide de la technologie Gateway™
• Expression stable, à long terme, régulée par la tétracycline
• Expression protéique améliorée, jusqu’à 4 fois ou plus, par rapport aux systèmes d’expression lentivirale traditionnels
Principales caractéristiques
• WPRE du virus de l’hépatite de la marmotte, augmente l’expression transgénique et la cPPT du gène de l’intégrase VIH-1, augmente le nombre de copies de lentivirus s’intégrant dans le génome hôte, augmentant ainsi le titre viral. Le WPRE et la cPPT permettent ensemble de multiplier au moins par quatre l’expression protéique dans la plupart des types de cellules par rapport aux autres vecteurs dépourvus de ces éléments.
• Promoteur hybride composé du promoteur du cytomégalovirus humain (CMV) et de deux sites d’opérateurs de tétracycline 2 (TetO2) pour une expression de haut niveau régulée du gène cible
• Marqueur de sélection de la blasticidine pour une sélection stable sous contrôle du promoteur SV40
Le kit comprend
• Le vecteur pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST™ vector
• pLenti3.3⁄TR
• Le plasmide pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZ
• Tetracycline
• E. Coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ (réf. C737303)
• Plasmide de contrôle positif pENTRTM Gus.
À des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques.
Spécification
Spécification
| Système constitutif ou inductible | Inductible |
| Type de livraison | Lentiviral |
| Agent d’induction | Doxycycline, tétracycline |
| Accélérateur | CMV/TO |
| Type de produit | Kit de vecteur |
| Agent de sélection (eucaryotique) | Blasticidine |
| Contenu et stockage | Contenu Le kit de vecteur ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™ comprend les composants suivants : • 6 ug de vecteur pLenti6.3⁄TO / V5-DEST™ (40 µl de vecteur à 150 ng / µl dans le tampon TE, pH 8,0) • 20 ug de vecteur pLenti3.3 / TR (40 µl de vecteur à 0,5 µg / µl dans le tampon TE, pH 8,0) • 10 ug de plasmide pLenti6.3 / TO / V5-GW / lacZ (20 µl de plasmide à 0,5 µg / µl dans le tampon TE, pH 8,0) • 1 ml de tétracycline (10 mg / ml dans l’eau) • E. coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ (réf. C737303) : 21 x 50 µl de cellules Stbl3™, 6 ml de milieu S.O.C. Milieu et 50 µl d’ADN de contrôle pUC19 (10 pg / µl). • Plasmide de contrôle positif pENTR™ Gus. Stockage •Vecteurs : -20°C • Tétracycline : -20°C (à l’abri de la lumière) • E. coli chimiquement compétent One Shot™ Stbl3™ : -80°C • Contrôle positif pENTR™ Gus : -20°C |
| Résistance aux antibiotiques des bactéries | Ampicilline (AmpR), blasticidine (BsdR) |
| Clivage | Aucun site de clivage |
| Enzyme Gateway | LR Clonase™ II Plus, LR Clonase™ II |
| Afficher plus |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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