Thermo Scientific™ Y-PER™ Yeast Protein Extraction Reagent

Ce tampon de lyse cellulaire à base de détergent élimine la nécessité de recourir à des microbilles de verre ou à une rupture mécanique afin de percer l’épaisse enveloppe cellulaire protéique et d’extraire les protéines. Le réactif Y-PER est efficace pour S. cerevisiae et d’autres espèces courantes : il peut ainsi être utilisé lors de procédures de purification de protéines de fusion marquées et de dosages enzymatiques de gènes rapporteurs utilisant ces organismes modèles. Le réactif de lyse peut également être utilisé pour extraire de l'ADN génomique ou plasmidique à partir d'une levure. Le protocole standard d'extraction des protéines est très simple : il suffit d'ajouter un volume approprié de réactif Y-PER à un culot de cellules de levure, d'incuber à température ambiante pendant approximativement 20 minutes, et de centrifuger les débris. Le surnageant obtenu est une solution protéique concentrée dont le rendement excède largement celui typiquement obtenu par une rupture traditionnelle avec des billes de verre.

Points clés :

• Plus de protéines – extrait plus de deux fois plus de protéines que les méthodes de microbilles de verre

• Moins fastidieux – élimine les difficultés associées aux procédures de lyse traditionnelles avec des microbilles de verre (p. ex., adhérence statique des billes chargées, amas de microbilles/protéines et perte de microbilles)

• Optimisé pour la levure – validé pour une utilisation avec Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe et Pichia pastoris

• Polyvalent – efficace pour de nombreux organismes différents, notamment Bacillus subtilus et les bactéries gram-positif et gram-négatif ; adapté à une utilisation dans une gamme variée de situations