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Invitrogen™ MessageAmp™ Premier RNA Amplification Kit
Description
Includes
110 μl de mélange d’enzymes de premier brin ; 440 μl de mélange de tampons de premier brin ; 220 μl de mélange d’enzymes de deuxième brin ; 550 μl de mélange de tampons de deuxième brin ; 660 μl de mélange d’enzymes T7 ; 2X1,1 ml de mélange T7 Biotin IVT ; 10 μl d’ARN témoin 1 mg/ml ; 1,75 ml d’eau sans nucléase ; 6 ml de concentré tampon de liaison d’aARN ; 1,2 ml de microbilles de liaison d’ARN ; 30 ml de concentré de solution de lavage d’aARN ; 15 ml de solution d’élution d’ARNum ; 1 ml de tampon de fragmentation de matrice5X ; 2 plaques à fond en U 4 PCR ;1 réservoir ; 10 ml d’eau sans nucléase
Le kit utilise la méthodologie éprouvée pour la préparation et l’étiquetage des échantillons d’ARN basée sur la technologie d’amplification de transcription in vitro (IVT) T7 originale, connue sous le nom de méthode de transcription Eberwine ou de transcription inverse-IVT (RT-IVT). La méthode RT-IVT est considérée comme la référence pour la préparation d’échantillons dans le profilage d’expression basé sur des microarrays. Elle est bien documentée dans la littérature scientifique actuelle et a été validée expérimentalement grâce au procédé RT-PCR TaqMan™. S’appuie sur la méthode d’amplification d’ARN linéaire et les réactifs développés pour les kits MessageAmp™ II avec des améliorations créant un flux de travail simplifié, des performances améliorées et des exigences d’entrée d’ARN plus flexibles.
Utilisation du kit d’amplification d’ARN MessageAmp Premier
Basée sur cette stratégie éprouvée d’amplification enzymatique et d’étiquetage, la procédure MessageAmp Premier commence par une simple réaction de synthèse d’ADNc utilisant la transcriptase inverse ArrayScript™. Aucune étape de nettoyage n’est requise après la TI ; l’ADNc est utilisé directement dans une réaction IVT à haut rendement à l’aide de la technologie MEGAscript. L’IVT est configurée pour incorporer le nucléotide modifié, biotine-UTP, dans l’ARNa synthétisé. (Dans ce protocole, l’ARN amplifié est appelé ARNa ; dans la littérature, il est aussi communément appelé ARNc.) Une fois purifié, l’ARNa peut être utilisé sur les plateformes microarray d’analyse d’expression génétique conçues pour des échantillons d’ARN antisens modifiés à la biotine.
- Exigences d’entrée d’ARN très flexibles : 20-500 ng d’ARN total, selon le type de tissu ou de cellule
- Flux de travail rationalisé : selon les quantités d’entrée d’ARN, un seul jour de traitement est nécessaire pour effectuer une expérience microarray
- Protocole simplifié et réactifs rationalisés
- Kit complet : tout ce qui est nécessaire pour préparer l’ARNa modifié par la biotine est inclus
- Contrôle de qualité rigoureux incluant l’analyse GeneChip™
- L’IVT T7 MEGAscript™ offre une amplification jusqu’à 50 000 fois
- Format tube unique
- Purification d’ARNa à billes magnétiques, facile à utiliser et à récupération élevée
Exigences d’entrée d’ARN les plus faibles pour un seul tour d’amplification :
- 20 ng d’ARN total produisent suffisamment d’ARNa modifié à la biotine pour la plupart des formats de microarrays, avec des résultats équivalents à ceux obtenus à partir d’échantillons préparés à partir de matériaux de départ significativement plus volumineux à l’aide d’autres kits RT-IVT
Marquage de matrice d’expression, analyse et génotypage d’expression de gènes, analyse de microarray, amplification d’ARN
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Spécification
Spécification
| Type de produit | Kit d’amplification d’ARN |
| Contenu et stockage | • µMélange d'enzymes de premier brin 11 l (-20°C) • µTampon de premier brin 44 l (-20°C) • µMélange d'enzymes de deuxième brin de 22 l (-20°C) • µMélange de tampon de deuxième brin 55 l (-20°C) • µMélange d'enzymes T7 66 l (-20°C) • µMélange IVT biotine 220 l T7 (-20°C) • µ10 l d'ARN de contrôle 1 mg/ml (-20°C) • 1,75 ml d'eau exempte de nucléase (toute température) • µConcentré de tampon de liaison d'aRNA de 600 l (température ambiante) • µBilles de liaison à l'ARN de 120 l (4°C) • Concentré de solution de lavage d'aRNA de 10 ml (température ambiante) • Solution d'élution d'aRNA de 5 ml (4°C ou température ambiante) • Tampon de fragmentation de baie 5X de 1 ml (température ambiante) • 10 & bouchons de tubes PCR à 8 bandes (température ambiante) • 1 plaque de fond en U. (Température ambiante) • 1 réservoir (température ambiante) • 10 ml d'eau exempte de nucléase (Toute température) |
| Comprend l’étiquette ou le colorant | Oui |
| Méthode d’étiquetage | Marquage direct |
| Transcriptase inverse | ArrayScript™ |
| Type d’échantillon | ARN poly(A+), ARN total |
| Format | Kit |
| Gamme de produits | Ambion™, MessageAmp™ Premier |
| Quantité | 10 réactions |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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