IBA Lifesciences Kit d’isolement des cellules T naïves CD4+ CD45RA+ Fab Streptamer™

Description

• Microbilles magnétiques Strep-Tactin™ pour Fab Streptamers™ ; 3 flacons pour 5 x 10⁸ cellules chacun
• CD4 humain Fab-Strep pour l’isolement des cellules T ; 1 flacon pour 1x 10⁹ cellules
• CD45RA Fab-Strep, humain pour l’isolement des cellules T ; 1 flacon pour 5 x 10⁸ cellules
• Solution mère de biotine pour la technologie Streptamer™ ; 3 x 1 ml
• Tampon IS, tampon de lavage Streptamer™, 10 x concentré ; 2 x 50 ml
• L’isolement des cellules T humaines CD4+ CD45RA+ est effectué par sélection double positive en série. Dans une première étape, les PBMC sont marquées avec des Streptamers magnétiques CD4 Fab™. Les cellules marquées sont isolées dans un aimant puissant (StrepMan, position horizontale) où elles migrent vers la paroi du tube sur le côté de l’aimant. Cette fraction de cellules CD4 positives est recueillie et les cellules sont libérées de tous les réactifs de marquage par addition de biotine dans un aimant puissant (StrepMan, position verticale). Les Streptamers magnétiques™ migrent vers la paroi du tube et les cellules exemptes de marquage restent dans le surnageant. La biotine est éliminée par lavage. Les cellules CD4 positives pures et sans marquage sont soumises à une deuxième sélection positive avec des Streptamers™ magnétiques CD45RA Fab suivant la même procédure.
• La préparation cellulaire qui en résulte est hautement enrichie en cellules T régulatrices CD4+ CD45RA d’une pureté supérieure à 90 %. Aucune colonne n’est nécessaire.