Molecular Probes™ CellLight™ Nucleus-CFP, BacMam 2.0

CellLight™ Nucleus-CFP, BacMam 2.0, fournit une façon simple de marquer les endosomes précoces avec une protéine fluorescente cyan (CFP) dans des cellules vivantes. Il vous suffit d’ajouter le réactif à vos cellules et de laisser incuber pendant une nuit. Les cellules sont prêtes à être observées au matin.

Vous souhaitez marquer d’autres structures cellulaires ? En savoir plus sur les outils de marquage des protéines fluorescentes CellLight™

Cette construction prête à l’emploi est transfectée dans des cellules à l’aide de la technologie BacMam 2.0, où elle exprime le CFP fusionné à la séquence de localisation nucléaire SV40. Vous pouvez observer le comportement du noyau-CFP dans les cellules vivantes sans la toxicité cellulaire associée aux intercalants et procéder au marquage avec plusieurs colorants de suivi ou de traçage pour l’observation des processus cellulaires dynamiques.

Les cellules exprimant les constructions CellLight™ peuvent également être fixées au formaldéhyde pour l’imagerie multiplexée à l’aide de techniques immunocytochimiques.

Caractéristiques de la technologie CellLight™ :

Rapide et pratique : ajoutez simplement le réactif CellLight™ à vos cellules, laissez incuber pendant la nuit et observez ; ou conservez les cellules congelées et prêtes pour un dosage ultérieur

Très efficace : jusqu’à 90 % de transduction d’un large éventail de lignées cellulaires de mammifères, notamment des cellules primaires, des cellules souches et des neurones

Flexible : effectuez la cotransduction de plus d’un réactif BacMam pour des expériences multiplexes ou des études de colocalisation ; contrôlez rigoureusement les niveaux d’expression simplement en variant la dose

Moins toxique : Les réactifs CellLight™ ne se répliquent pas dans les cellules de mammifères et conviennent pour une manipulation de niveau de sécurité biologique (BSL) 1

Technologie BacMam

CellLight™ Nucleus-CFP, BacMam 2.0, est une construction de fusion de la séquence de localisation nucléaire SV40 et de la PCP, fournissant un ciblage précis et spécifique au noyau-CFP cellulaire. Cette construction de fusion est conditionnée dans le virus d’insecte baculovirus, qui ne se réplique pas dans les cellules humaines et qui est désigné comme pouvant être utilisé en toute sécurité dans la plupart des laboratoires appliquant le niveau de sécurité biologique (BSL) 1. La technologie BacMam garantit que la plupart des types de cellules de mammifères sont transduits / transfectés avec une haute efficacité et une toxicité minimale. Cette transfection transitoire peut être détectée après une incubation d’une nuit, et ce pendant 5 jours maximum, offrant suffisamment de temps pour réaliser la plupart des analyses cellulaires dynamiques. Comme toute technique de transfection / transduction, la méthode BacMam ne transfecte / transduit pas toutes les cellules avec la même efficacité, ce qui la rend peu adaptée à des études de population cellulaire ou à une imagerie / numération automatisée. Les réactifs CellLight™ conviennent parfaitement aux expériences où la colocalisation cellulaire ou infracellulaire est nécessaire, ou aux études de la fonction cellulaire qui requièrent une résolution spéciale.