Invitrogen™ CytoVista™ 3D Cell Culture Clearing Reagent

Ce processus de défrichement permet d’obtenir une imagerie fluorescente 3D nette et lumineuse à des profondeurs allant jusqu’à 1 000 µm. Le réactif peut également être utilisé comme solution d’imagerie avec une conservation stable des cultures cellulaires 3D pendant plusieurs semaines avec un changement minimal de la morphologie ou de la luminosité tissulaire, ou de la spécificité des fluorophores.

Caractéristiques de la gamme CytoVista de réactifs de défrichement des cultures tissulaires et cellulaires 3D :
• Défrichement rapide des tissus marqués par fluorescence pour l’imagerie 3D
• Rétrécissement, expansion ou modifications morphologiques minimums des tissus
• Flux de travail simple ne nécessite aucun instrument ou équipement spécial et facilement adaptable à l’IHC
• Compatible avec la plupart des fluorophores, y compris les colorants et les protéines fluorescentes

Le flux de défrichement CytoVista permet de défricher les cultures tissulaires ou cellulaires 3D présentant des changements morphologiques minimes ou sensibles à la détection avec quasiment tous les fluorophores. Grâce à un protocole facile à utiliser, le cerveau entier de la souris (section de 8 mm) peut être épuré en 24 heures (ou une coupe de 1 mm en 2 heures), sans utiliser d’instruments ou d'équipement spéciaux.

Le flux de travail de clairance CytoVista est compatible avec la plupart des fluorophores, y compris les protéines fluorescentes détectées avec des instruments d’imagerie de fluorescence courants, comme les microscopes à champ large, les analyseurs à haut contenu, les microscopes confocaux et les microscopes à feuille de lumière. Nous recommandons aux nouveaux utilisateurs le kit CytoVista de défrichement/coloration tissulaire (réf. nº V11324) ou le kit CytoVista de défrichement/coloration de cultures cellulaires 3D (réf. nº V11325). Ces kits contiennent tous les réactifs nécessaires au défrichement et à la coloration par IHC.

La technologie CytoVista défriche suffisamment les tissus avant toute imagerie fluorescente en 3D, sans considérablement modifier leur morphologie, contrairement aux autres techniques de défrichement. Des changements morphologiques minimes, tels que le rétrécissement et la contraction, ont été observés. Pour les échantillons précieux, le défrichement peut être inversé et le tissu peut être traité en vue d’études histologiques, comme la coloration H&E.

Pour les tissus plus faciles à défricher, comme le cerveau, les poumons, l’intestin, la peau et les tissus de moins de 250 µm d’épaisseur, le traitement avec le réactif de défrichement tissulaire CytoVista est suffisant pour l’imagerie 3D. Cependant, les tissus de plus de 250 µm d’épaisseur ou difficiles à défricher comme les reins, le foie, le cœur et le placenta nécessitent un traitement initial avec le réactif de défrichement tissulaire CytoVista puis d’un traitement avec l’amplificateur de défrichement tissulaire CytoVista.

Le réactif de défrichement des cultures cellulaires 3D CytoVista est recommandé pour les sphéroïdes ou les organoïdes d’une épaisseur maximale de 1 mm.

Le réactif de défrichement tissulaire CytoVista n’est pas recommandé avec les tissus durs comme les os, le cartilage et les tissus conjonctifs.