Invitrogen™ CytoVista™ Antibody Dilution Buffer

Ce tampon se compose de PBS avec 0,2 % de Tween 20, d’héparine, 3 % de sérum d’âne et 5 % de DMSO. Il aide les anticorps à pénétrer dans les tissus tout en bloquant un signal non spécifique, ce qui permet d’obtenir des images nettes et lumineuses à toutes les profondeurs de tissus ou de culture cellulaire 3D lorsqu’il est utilisé avec d’autres produits CytoVista.

Les caractéristiques de la gamme de réactifs de clairance tissulaire et de culture cellulaire 3D CytoVista sont les suivantes :
• Défrichement rapide des tissus marqués par fluorescence pour l’imagerie 3D
• Rétrécissement, expansion ou modifications morphologiques minimums des tissus
• Flux de travail simple ne nécessite aucun instrument ou équipement spécial et facilement adaptable à l’IHC
• Compatible avec la plupart des fluorophores, y compris les colorants et les protéines fluorescentes

Le flux de défrichement CytoVista permet de défricher les cultures tissulaires ou cellulaires 3D présentant des changements morphologiques minimes ou sensibles à la détection avec quasiment tous les fluorophores. Grâce à un protocole facile à utiliser, le cerveau entier de la souris (section de 8 mm) peut être épuré en 24 heures (ou une coupe de 1 mm en 2 heures), sans utiliser d’instruments ou d'équipement spéciaux.

Le flux de travail de clairance CytoVista est compatible avec la plupart des fluorophores, y compris les protéines fluorescentes détectées avec des instruments d’imagerie de fluorescence courants, comme les microscopes à champ large, les analyseurs à haut contenu, les microscopes confocaux et les microscopes à feuille de lumière. Nous recommandons aux nouveaux utilisateurs le kit CytoVista de défrichement/coloration tissulaire (réf. nº V11324) ou le kit CytoVista de défrichement/coloration de cultures cellulaires 3D (réf. nº V11325). Ces kits contiennent tous les réactifs nécessaires au défrichement et à la coloration par IHC.

La technologie CytoVista défriche suffisamment les tissus avant toute imagerie fluorescente en 3D, sans considérablement modifier leur morphologie, contrairement aux autres techniques de défrichement. Des changements morphologiques minimes, tels que le rétrécissement et la contraction, ont été observés. Pour les échantillons précieux, le défrichement peut être inversé et le tissu peut être traité en vue d’études histologiques, comme la coloration H&E.

Pour les tissus plus faciles à défricher, comme le cerveau, les poumons, l’intestin, la peau et les tissus de moins de 250 µm d’épaisseur, le traitement avec le réactif de défrichement tissulaire CytoVista est suffisant pour l’imagerie 3D. Cependant, les tissus de plus de 250 µm d’épaisseur ou difficiles à défricher comme les reins, le foie, le cœur et le placenta nécessitent un traitement initial avec le réactif de défrichement tissulaire CytoVista puis d’un traitement avec l’amplificateur de défrichement tissulaire CytoVista.

Le réactif de défrichement des cultures cellulaires 3D CytoVista est recommandé pour les sphéroïdes ou les organoïdes d’une épaisseur maximale de 1 mm.

Le réactif de défrichement tissulaire CytoVista n’est pas recommandé avec les tissus durs comme les os, le cartilage et les tissus conjonctifs.