Thermo Scientific™ Easy-Titer™ Human IgG (H+L) Assay Kit

Ces kits contiennent des microbilles sensibilisées aux anticorps pour mesurer la concentration spécifique d’anticorps de souris, de lapin et d’homme au moyen d’une technique simple et rapide : micro-agglutination, à l’aide de microplaques standard et un lecteur de plaques à visibilité UV (spectrophotomètre). Chaque kit est spécifiquement destiné à une espèce et à une classe précises d’immunoglobulines. Contrairement au dosage protéique total, il permet de mesurer de manière spécifique la concentration d’anticorps cibles dans les échantillons (sérum, plasma, surnageant de culture) contenant d’autres protéines. Extrêmement sensibles, les kits n’ont besoin de que très faibles volumes d’échantillons. La concentration en anticorps est déterminée par la réponse du dosage (absorbance) comparée à une courbe standard préparée à l’aide de dilutions d’un échantillon d’anticorps connu (vendu séparément).

Points clés :

• Kits pour cinq cibles courantes – choisissez un kit spécifiquement destiné à une espèce particulière et une classe d’immunoglobulines ; aucune réaction croisée avec d’autres espèces et classes d’anticorps cible

• Spécificité basée sur les anticorps – mesure la concentration de l’anticorps cible dans un échantillon, et non seulement dans les protéines totales ; il n’est pas nécessaire de purifier l’anticorps pour évaluer sa concentration

• Plus rapide et facile que le test ELISA – dosage homogène à trois composants ; temps d’incubation total de 10 minutes

• Aucun équipement spécial requis – utilise un agitateur vortex standard, un pipeteur, une microplaque à 96 puits, un agitateur et un lecteur de plaques (mesure l’absorbance à 340 nm ou 400 nm)

• Sensible – plage de dosage (courbe standard) de 8 à 500 ng/ml ; nécessite un échantillon de départ d’au moins 300 ng/ml

• Reproductible – coefficient de variation inférieur à 5 % ; l’erreur dépend de la technique de dilution et de pipetage

• Étalons d’anticorps vendus séparément – utilisez tous les étalons d’anticorps avec l’identité appropriée de la cible et la concentration connue (supérieure à 10 μg/ml)

Les analyses et la titration facile des anticorps sont plus rapides et plus simples à réaliser que les tests ELISA :

1. Préparez des étalons (5 à 500 ng/ml) en diluant de l’anticorps purifié dans un kit de tampon de dilution

2. Préparez les échantillons en diluant au moins 20 fois le volume dans un tampon de dilution pour atteindre la plage de mesure (8 à 500 ng/ml).

3. Dans un flacon, mélangez les microbilles pour créer une suspension homogène.

4. Avec la pipette, prélevez 20 μlitres de suspension de microbilles et 20 μlitres de chaque échantillon et étalon, et versez-les dans les puits de la microplaque 96 puits.

5. Mettez la microplaque en incubation pendant 5 minutes en mélangeant vigoureusement.

6. Ajoutez 100 μl de réactif de blocage.

7. Mettez la microplaque en incubation pendant 5 minutes en mélangeant vigoureusement.

8. Mesurez l’absorbance sur un lecteur de plaques standard (340 ou 405 nm).

9. Tracez une courbe standard et interpolez les échantillons afin de déterminer la concentration.

Comprend :

Chaque kit contient des microbilles sensibilisées à l’IgG spécifiques de la cible, un tampon de dilution et un tampon de blocage.