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Thermo Scientific™ MboII (5 U/μL)
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ADN Lambda (dam-) digéré avec Mboll, 1,4 % d’agarose, 130 sites de clivage
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
5'...G A A G A (N)8▵...3'
3'...C T T C T (N)7▵...5'
Conditions pour une activité à 100 % :
- Tampon B 1X : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl2 10 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage :
- MboII est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl 50 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Effets de méthylation :
- Dam : possibilité de chevauchement ; blocage
- v
- CpG : possibilité de chevauchement —aucun effet
- EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
- EcoBI : possibilité de chevauchement —aucun effet
Remarque :
Dosé à l’aide d’ADN Lambda (dam) (#SD0021). Mboll est bloquée par le chevauchement avec la méthylation dam. Pour éviter la méthylation dam, utilisez une souche dam, dcm- telle que GM2163 (#M0099). Une digestion en excès supérieure à 15 fois avec Mboll peut induire une activité Star. MboII produit des fragments d’ADN qui ont une extension 3 de base simple, plus difficiles à ligaturer que des fragments à extrémité franche. Mboll peut rester associée à l’ADN clivé. Cela peut provoquer un décalage de la bande d’ADN pendant l’électrophorèse. Pour éviter de voir des bandes d’ADN atypiques, utilisez le colorant de charge d’ADN 6X et une solution SDS pour la préparation des échantillons, ou chauffez l’ADN digéré en présence de SDS avant l’électrophorèse.
Spezifikation
Spezifikation
| Concentration | 5 U / μl |
| Sensibilité à la méthylation | Sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dcm |
| Enzymes | MboII |
| Tampon compatible | Tampon 10X B |
| Sensible à l’inactivation thermique | Oui |
| Température de réaction optimale | 37°C |
| Enzymes de restriction de type IIS | Oui |
| Quantité | 300 U |
| Type de produit | Enzyme de restriction |
| Catégorie de recherche | Clonage transparent |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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