Thermo Scientific™ RNase H (5 U/μl)

• N’hydrolyse pas les liaisons phosphodiesters de l’ADN et l’ARN simple brin et double brin

• L’absence d’endodésoxyribonucléases, d’exo-désoxyribonucléases et de ribonucléases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.

Source :

• Cellules MRE-600 E. coli

Poids moléculaire :

• Monomère 18,4 kDa

Définition de l’unité d’activité :

• Une unité de l’enzyme catalyse la formation de 1 nmol de produits solubles dans l’acide en 20 min à 37°C
• L’activité enzymatique est dosée dans le mélange suivant : Tris-HCl 20 mM (pH 7,8), KCl 40 mM, MgCl₂ 8 mM, DTT 1 mM, [³H]-poly(A)·poly(dT) 24 μM, BSA 0,03 mg/ml, glycérol 4 % (v/v)

• L’enzyme est fournie sous la forme suivante : HEPES-KOH 25 mM (pH 8,0), KCl 50 mM, EDTA 0,1 mM, DTT 1 mM, BSA 0,1 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Tampon de réaction 10X :

• 200 mM de Tris-HCl (pH 7,8), 400 mM de KCl, 80 mM de MgCl₂, 10 mM de DTT

Inhibition et inactivation :

• Inhibiteurs : chélateurs de métaux, réactifs bloquants de SH
• Inactivation thermique à 65°C pendant 10 min.

Recommandées dans les cas suivants :

• Élimination de l’ARNm avant la synthèse de l’ADNc du deuxième brin (1)
• PCR en temps réel et PCR quantitative en temps réel : élimination de l’ARN après la synthèse de l’ADNc du premier brin
• Élimination des séquences poly(A) de l’ARNm après hybridation avec l’oligo(dT) (2)
• Clivage de l’ARN spécifique au site (3)
• Études de produits de réaction de polyadénylation in vitro