Invitrogen™ GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Enzyme Mix

Le mélange d’enzymes de clonage et d’assemblage transparents GeneArt™ permet le clonage simultané et directionnel de 1 à 4 fragments de PCR, composés de n’importe quelle séquence, dans n’importe quel vecteur linéarisé, en une seule réaction à température ambiante de 30 minutes. Le mélange d’enzymes transparentes GeneArt™ est le choix le plus économique pour créer des constructions allant jusqu’à 13 kb avec la possibilité d’un assemblage à haut débit.

• Efficacité : option de clonage préalable pour les fragments de grande taille afin d’augmenter l’efficacité de clonage.
• Rapidité et simplicité : clonez des fragments d’ADN, avec la séquence de votre choix, en un seul vecteur (jusqu’à 13 kb) ; aucun site de digestion par enzymes de restriction, de ligature ou de recombinaison requis.
• Outils gratuits : concevez votre construction finale et vos oligos d’ADN in silico en utilisant notre outil Web gratuit qui vous guide étape par étape dans l’ensemble de votre projet.
• Flexibilité du vecteur : utilisez notre vecteur linéaire ou un vecteur de votre choix.

Pour le clonage d’éléments d’ADN préexistants depuis trop longtemps pour être amplifiés par PCR et pour des molécules finales jusqu’à 40 Kb, envisagez le kit de clonage et d’assemblage GeneArt™ Seamless PLUS (1 à 4 fragments d’ADN uniquement) ; et pour les molécules finales supérieures à 110 Kb, envisagez le système d’assemblage génétique de haut niveau GeneArt™.

Création de clones simples et rapides
Le clonage GeneArt™ Seamless est un processus simple en deux étapes, composé d’un assemblage in vitro suivi d’une transformation. Le mélange enzymatique utilise un mélange d’enzymes / tampons exclusif pour assembler des fragments d’ADN sans séquences supplémentaires ni cicatrices (“transparent”). L’homologie des extrémités terminales est facilement incorporée par amplification par PCR avec des oligos d’ADN adaptés conçus à l’aide de notre outil web gratuit.

Efficacité, flexibilité et précision du clonage
Le succès du clonage ne dépend pas de la séquence d’inserts ni du type de vecteur, ce qui vous permet de concevoir et d’ajouter presque n’importe quelle séquence, ou combinaison de séquences, souhaitée à n’importe quel plasmide tant qu’elle peut être linéarisée par une digestion par enzymes de restriction ou par PCR. Les clones circularisés obtenus à partir de la réaction ne contiennent que la séquence de votre vecteur d’origine, des inserts, les homologies Clonage désignées, sans insertions de nucléotides étrangères.

Assistance de conception de clonage in silico
Une étape clé du clonage GeneArt™ Seamless est la conception correcte des fragments et des oligos avec une homologie et un espacement adaptés, ce qui contribue au succès de l’assemblage de votre clone. Pour simplifier et accélérer le processus de conception, nous proposons un outil en ligne gratuit, l’outil de conception pour l’assemblage et la mutagenèse transparente ou de haut niveau GeneArt™ qui vous aidera à concevoir vos expériences in silico. L’outil guide l’utilisateur dans la conception de la construction, notamment pour l’importation, l’ordre et l’orientation des fragments ; il vérifie les zones de l’homologie et les éventuels problèmes de conception ; il crée des amorces pour le pré-clonage ou l’incorporation de l’homologie des extrémités terminales entre les fragments, si nécessaire ; puis il génère les fichiers de la carte de construction finale et la séquence au format Genbank pour le téléchargement ou l’importation dans le logiciel Vector NTI™.

Applications
Le mélange enzymatique de clonage et d’assemblage GeneArt™ Seamless est conçu pour permettre le clonage et l’assemblage d’ADN dans un large éventail d’applications de biologie moléculaire et de biologie synthétique, entre autres. Ce produit permet de créer des vecteurs d’expression modulaires, avec des éléments interchangeables, et peut être utilisé pour effectuer une variété d’opérations qui nécessiteraient sinon une multitude d’étapes. Utilisez le mélange pour construire des protéines hybrides ; supprimer, remplacer ou ajouter des éléments ADN tels que des sites de restriction dans un vecteur existant ; et exécuter de nombreuses autres techniques qui nécessitent une manipulation de séquences génétiques.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.