Gibco™ Advanced DMEM/F-12

Le milieu avancé DMEM ⁄ F-12 (Dulbecco’s Modified Eagle Medium/Ham’s F-12) est un milieu basal communément utilisé, qui permet la culture de cellules de mammifère avec une supplémentation moindre en sérum de veau fœtal (SVF). Par rapport au DMEM ⁄ F-12 classique, la supplémentation en sérum peut être réduite de 50 –à 90 % sans que cela affecte la vitesse de croissance ou la morphologie. Parmi les cellules mises en culture avec succès dans le milieu avancé DMEM ⁄ F-12, sans adaptation, figurent les cellules MRC-5, SP2, Vero, WI-38 et Jurkat.

Ce milieu avancé DMEM/F-12 est fabriqué comme suit :
Avec : Glucose, acides aminés non essentiels, rouge de phénol, pyruvate de sodium
Sans : L-glutamine, HEPES

La formulation complète est disponible.

Utilisation du milieu avancé DMEM
Le milieu avancé DMEM est unique par rapport à d’autres milieux en raison de l’ajout des ingrédients suivants pour permettre la réduction du sérum : éthanolamine, glutathion, acide ascorbique, insuline, transferrine, sérum-albumine bovine riche en lipides AlbuMAX™ II pour la culture cellulaire et les oligo-éléments sélénite de sodium, métavanadate d’ammonium, sulfate de cuivre et chlorure de manganèse. Le milieu DMEM ⁄ F-12 avancé nécessite une supplémentation de 1 – 5 % de sérum de veau fœtal et de 4 mM de L-glutamine ou de supplément GlutaMAX™. De nombreuses lignées cellulaires ne nécessitent pas d’adaptation à ce milieu. La concentration de sérum de veau fœtal doit être optimisée pour chaque lignée cellulaire afin d’obtenir une réduction maximale du sérum. Le milieu avancé DMEM/F-12 utilise un système de tampon au bicarbonate de sodium (3,7 g/l) et nécessite donc un environnement contenant 5 – 10 % de CO₂ pour préserver le pH physiologique.