Invitrogen™ Bac-to-Bac™ Vector Kit

• Contient le vecteur pFastBac™1, ainsi que le vecteur de contrôle de l’expression, destiné à être utilisé dans le cadre du système d’expression baculovirus Bac-to-Bac, qui permet la production efficace de baculovirus recombinant pour les tests d’expression dans les cellules d’insectes
• S’appuie sur la génération de baculovirus recombinant par transposition spécifique au site dans E. coli plutôt que la recombinaison homologue dans les cellules d’insectes
• Le vecteur pFastBac 1 fourni par ce kit offre un promoteur de polyédrine fort pour l’expression des protéines et un grand site de clonage multiple pour un clonage simplifié
• Bacmide d’expression à gain de temps : la cassette d’expression du vecteur pFastBac se recombine avec le bacmide parent dans E. coli DH10Bac
• Cellules compétentes pour former un bacmide d’expression : le bacmide est ensuite transfecté dans des cellules d’insectes pour la production de particules de baculovirus recombinantes
• Sélection facile des colonies :
• Le bacmide parent dans E.coli DH10Bac contient un segment du gène lacZα
• Le gène lacZα est perturbé lors de la transposition de la cassette d’expression dans le bacmide permettant la sélection bleue / blanche des recombinants

Production et titration de baculovirus, Expression des insectes, Expression des protéines, Protéines, Expression, Isolement et analyse