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Invitrogen™ pcDNA™3.1/V5-His TOPO™ TA Expression Kit

Code produit. p-4925873
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Vecteur:
Vecteurs TOPO-TA, pcDNA
Quantité:
20 réactions
40 réactions
Conditionnement:
1 pièce
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Code produit. 10575383

Marque: Invitrogen™ K480001

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Offre une stratégie de clonage efficace, en 5 minutes et en une étape pour l’insertion directe de produits PCR amplifiés par la polymérase Taq dans un vecteur plasmide

  • Aucune ligase, procédure post-PCR ou amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ne sont requises
  • Une fois cloné, analysé et transfecté, le produit PCR s’exprimera directement dans les lignées cellulaires de mammifères
  • Le vecteur pcDNA3.1/V5-His TOPO est doté d’un puissant promoteur CMV pour une expression constitutive de haut niveau
  • Étiquette d’épitope V5 à l’extrémité C-terminale pour une détection facile de la protéine recombinante avec un anticorps anti-V5
  • La séquence polyhistidine à l’extrémité C-terminale (6xHis) pour une purification sur résine de chélation au nickel et une détection avec anticorps (extrémité C-terminale) anti-His
  • L’activation de la topoisomérase du vecteur pcDNA3.1/V5-His-TOPO permet aux produits PCR d’être ligaturés en 5 minutes sur paillasse et permet d’obtenir 90 % de recombinants
  • Le vecteur est doté d’un puissant promoteur CMV pour une expression constitutive de haut niveau
  • Étiquette d’épitope V5 à l’extrémité C-terminale pour une détection facile de la protéine recombinante avec un anticorps anti-V5

Expression constitutive, expression de mammifères, expression des protéines, protéines, expression, isolement et analyse

Informations sur la commande

Conditions d’expédition : Glace carbonique

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Spécification

Système constitutif ou inductible Constitutive
Type de livraison Transfection
Accélérateur CMV
Type de produit Kit d’expression TOPO TA
Agent de sélection (eucaryotique) Geneticin™ (G-418)
Contenu et stockage Boîte 1 (conserver à -20°C)
• 20 µl de pcDNA™3.1 / V5-His-TOPO™ (10 ng / µl)
• 100 µl de tampon PCR 10X
• 10 µl de mélange dNTP (50 mM)
• 50 µl de solution saline
• 1 ml d’eau stérile
• 10 µl de modèle PCR de contrôle (50 ng / µl)
• 10 µl d’amorces pour PCR de contrôle (100 ng / µl chacun)
• 20 µl d’amorce de séquençage T7 (100 ng / µl)
• 20 µl d’amorce de séquençage antisens BGH (100 ng / µl)
• 10 µl de plasmide de contrôle d’expression (500 ng /µl)

Boîte 2 (conserver à -80°C)
• 21 × 50 µl de cellules E. coli TOP10
• 50 µl d’ADN de contrôle pUC19 (10 pg / µl)
• 6 ml de milieu S.O.C. Moyenne
Marqueur de protéine Étiquette His (6x), étiquette d’épitope V5
Méthode de clonage TOPO™-TA
Quantité 20 réactions
Vecteur Vecteurs TOPO-TA, pcDNA
Gamme de produits TOPO, pcDNA
À utiliser avec (application) Expression constitutive
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

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