Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

Le kit TA Cloning s’appuie sur le vecteur de clonage pCR2.1 et la ligase d’ADN ExpressLink™ T4 de façon à générer, à température ambiante et en quinze minutes, un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir > 80 % de produits recombinants comportant des inserts.

• Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
• Efficacité : analyse des bleus / blancs et > 80 % de clones avec insert correct
• Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
• Simplicité : élimination de toute modification enzymatique du produit PCR
• Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
• Saillies 3’-T pour la ligature directe de produits PCR amplifiés par Taq
• Accélérateur de T7 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
• Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
• Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage

• Fonctionnement du TA Cloning™
• L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits de PCR.
• Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de désoxythymidine 3’ (T) simple.
• Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
• Configurations du kit
• Le kit TA Cloning™ est proposé dans différentes configurations : sans cellules compétentes (K2020-20 et K2020-40), avec des cellules chimiquement compétentes INVF’ E. coli One Shot™ (K2000-01 et K2000-40), avec des cellules chimiquement compétentes TOP10F’ E. coli One Shot™ (K2030-01 et K2030-40), et avec des cellules chimiquement compétentes E. coli One Shot™ TOP10 (K2040-01 et K2040-40), dans des configurations à 20 ou 40 réactions.

Clonage, clonage par PCR