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Invitrogen™ Kits TA Cloning™, promoteur double avec vecteur pCR™ 2,1 et cellules chimiquement compétentes One Shot™
Offre une stratégie de clonage rapide en une étape pour insérer directement un produit PCR amplifié par Taq dans un vecteur plasmidique
Marque: Invitrogen™ K205001
Code nomenclature Nacres: NA.54
Informations supplémentaires : Poids : 0.00500kg
Description
Les promoteurs T7 et Sp6 du vecteur pCR II permettent une transcription in vitro de l’insert en vue de générer des produits de type sens et antisens. Le kit TA Cloning Dual Promoter s’appuie sur le vecteur de clonage pCRII et la ligase d’ADN ExpressLink T4 de façon à générer, à température ambiante et en quinze minutes, un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir plus de >80 % de produits recombinants comportant des inserts.
- Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
- Efficacité : analyse des bleus / blancs et >80 % de clones avec un insert correct
- Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
- Simplicité : élimination de toute modification enzymatique du produit PCR
- Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
- Extrémités 3’-T pour une ligature directe des produits de PCR amplifiés par Taq
- Des accélérateurs de T7 et Sp6 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
- Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
- Sites d’amorce M13 sens et antisens pour le séquençage
- Fonctionnement du TA cloning\
- L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits PCR.
- Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de désoxythymidine 3’ (T) simple.
- Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
- Configurations du kit
- Le kit TA cloning est proposé dans une variété de configurations : avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot INVF’ (K2050-01 et K2050-40), des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot TOP10F’ (K2060-01 et K2060-40) et sans cellules compétentes (K2750-20 et K2750-40) dans les kits de 20 et de 40 réactions.
Clonage, clonage par PCR
Spécification
| TOP10F’ | |
| E. coli chimiquement compétent One Shot™ INVαF’ | |
| Stockez E. coli One Shot à -80°C. Stockez tous les autres composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois s’ils sont correctement stockés. |
| Vecteur pCRII linéarisé, ADN ligase ExpressLink T4, tampon de ligature d’ADN 5X ExpressLink T4, dNTP, tampon PCR 10X, eau stérile, contrôles, E. coli chimiquement compétent One Shot INVαF’, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle superenroulé. | |
| 20 réactions | |
| Vecteurs TA Cloning |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.