Learn More
Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli
Provides quick, one-step cloning strategy for directly inserting a Taq-amplified PCR product into plasmid vector
Marque: Invitrogen™ K205001
Code nomenclature Nacres: NA.54
Informations supplémentaires : Poids : 0.00500kg
Description
Les promoteurs T7 et Sp6 du vecteur pCR II permettent une transcription in vitro de l’insert en vue de générer des produits de type sens et antisens. Le kit TA Cloning Dual Promoter s’appuie sur le vecteur de clonage pCRII et la ligase d’ADN ExpressLink T4 de façon à générer, à température ambiante et en quinze minutes, un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir plus de >80 % de produits recombinants comportant des inserts.
- Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
- Efficacité : analyse des bleus / blancs et >80 % de clones avec un insert correct
- Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
- Simplicité : élimination de toute modification enzymatique du produit PCR
- Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
- Extrémités 3’-T pour une ligature directe des produits de PCR amplifiés par Taq
- Des accélérateurs de T7 et Sp6 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
- Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
- Sites d’amorce M13 sens et antisens pour le séquençage
- Fonctionnement du TA cloning\
- L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits PCR.
- Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de désoxythymidine 3’ (T) simple.
- Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
- Configurations du kit
- Le kit TA cloning est proposé dans une variété de configurations : avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot INVF’ (K2050-01 et K2050-40), des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot TOP10F’ (K2060-01 et K2060-40) et sans cellules compétentes (K2750-20 et K2750-40) dans les kits de 20 et de 40 réactions.
Clonage, clonage par PCR
Spécification
| TOP10F’ | |
| 20 réactions | |
| This kit contains linearized pCR™II vector, ExpressLink™ T4 DNA ligase, 5X ExpressLink™ T4 DNA ligation buffer, dNTPs, 10X PCR buffer, sterile water, and controls. Competent cell kits contain One Shot® chemically competent E. coli, S.O.C. medium, and a supercoiled control plasmid. Store One Shot® E. coli at -80°C. Store all other components at -20°C. All reagents are guaranteed stable for 6 months when properly stored. |
|
| TA Cloning® |
| Vecteur pCRII linéarisé, ADN ligase ExpressLink T4, tampon de ligature d’ADN 5X ExpressLink T4, dNTP, tampon PCR 10X, eau stérile, contrôles, E. coli chimiquement compétent One Shot INVαF’, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle superenroulé. | |
| TA Cloning Vectors | |
| INVαF´ | |
| One Shot™ |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.