Invitrogen™ CellLight™ Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0

Cette construction prête à l’emploi est transfectée dans des cellules à l’aide de la technologie BacMam 2.0, où elle exprime les RFP fusionnées aux Rab7a. Vous pouvez observer le comportement des endosomes tardifs-RFP dans des cellules vivantes indépendamment du pH des organites et marquer avec plusieurs colorants de suivi ou de traçage pour visualiser des processus cellulaires dynamiques.

Les cellules exprimant les constructions CellLight peuvent également être fixées avec du formaldéhyde pour une imagerie multiplexée à l’aide de techniques immunocytochimiques.

Technologie BacMam

CellLight Late Endosomes-RFP, BacMam 2.0, est une construction de fusion de Rab7a et du Tag RFP, fournissant un ciblage précis et spécifique des endosomes tardifs-RFP cellulaires. Cette construction de fusion est conditionnée dans le virus d’insecte baculovirus, qui ne se réplique pas dans les cellules humaines et qui est désigné comme pouvant être utilisé en toute sécurité dans la plupart des laboratoires appliquant le niveau de sécurité biologique (BSL) 1. La technologie BacMam garantit que la plupart des types de cellules de mammifères sont transduits / transfectés avec une haute efficacité et une toxicité minimale. Cette transfection transitoire peut être détectée après une incubation d’une nuit, et ce pendant cinq jours maximum, ce qui offre suffisamment de temps pour réaliser la plupart des analyses cellulaires dynamiques. Comme toute technique de transfection / transduction, la méthode BacMam ne transfecte / transduit pas toutes les cellules avec la même efficacité, ce qui la rend peu adaptée à des études de population cellulaire ou à une imagerie / numération automatisée. Les réactifs CellLight conviennent parfaitement aux expériences où la colocalisation cellulaire ou infracellulaire est nécessaire, ou aux études de la fonction cellulaire qui requièrent une résolution spéciale.

• Rapide et pratique : ajoutez simplement le réactif CellLight aux cellules, laissez incuber pendant la nuit et imagez ou stockez les cellules congelées et prêtes pour essai pour une utilisation ultérieure
• Très efficace : jusqu’à 90 % de transduction d’un large éventail de lignées cellulaires de mammifères, notamment des cellules primaires, des cellules souches et des neurones
• Flexible : effectuez la cotransduction de plusieurs réactifs BacMam pour des expériences multiplexes ou des études de colocalisation ; contrôlez rigoureusement les niveaux d’expression simplement en variant la dose
• Moins toxique : les réactifs CellLight sont non réplicatifs dans les cellules de mammifères et conviennent à la manipulation de niveau de sécurité biologique (BSL) 1

Analyse cellulaire, structure cellulaire, suivi et traçage cellulaire, imagerie cellulaire, endosomes, immunofluorescence (IF), traçage des organites