Invitrogen™ Test Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 HCS

Le dosage Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS est une alternative supérieure aux dosages de prolifération traditionnels qui est optimisée pour les applications d’imagerie à haut contenu. Dans ce dosage, l’EdU analogue à la thymidine modifiée est efficacement incorporé à l’ADN fraîchement synthétisé et il est marqué de façon fluorescente avec le colorant brillant et photostable Alexa Fluor dans une réaction click rapide et hautement spécifique. Ce marquage fluorescent des cellules en prolifération est précis et compatible avec les méthodes d’anticorps en raison du protocole à clic léger. Les méthodes de détection de prolifération les plus précises sont fondées sur l’incorporation et la mesure d’analogues nucléosidiques dans l’ADN nouvellement synthétisé, avec du bromodéoxyuridine (BrdU) qui est un analogue couramment utilisé. L’ADN marqué par le BrdU est quantifié à l’aide d’anticorps anti-BrdU suite à la dénaturation de l’ADN par des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) afin d’exposer les molécules de BrdU. Cette étape est chronophage et difficile à réaliser de façon constante. Le traitement agressif peut également avoir un effet nocif sur l’intégrité et la qualité des échantillons, ce qui complique la co-coloration avec d’autres anticorps.

• Simple : fonctionne dès la première fois, chaque fois, en moins de temps
• Efficace : aucune étape de dénaturation ou de traitement agressif requise
• Résultats riches de contenu : meilleure conservation de la morphologie des cellules, de la structure des antigènes et de l’intégrité de l’ADN
• Constant : la détection n’est pas dépendante des lots d’anticorps variables
• Moins de risques

Méthodologie de prolifération supérieure
Le test Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS offre une alternative supérieure aux tests BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire. L’EdU (5-éthynyl-2’-déoxyuridine) est un analogue nucléosidique de la thymidine ; il est incorporé à l’ADN au cours de la synthèse de l’ADN active. Avec le kit Click-iT EdU, une fixation légère et la perméabilisation du détergent suffisent pour que le réactif de détection basé sur les petites molécules Click-iT EdU ait accès à l’ADN. Par conséquent, l’essai HCS Click-iT EdU n’est pas seulement facile à utiliser, il est aussi plus précis et compatible avec l’analyse des cycles cellulaires et d’autres cibles intra- ou extracellulaires pour des résultats réellement riches en contenu.

L’essai Click-iT peut être utilisé sur les cellules en culture ou in vivo suite à l’administration d’EdU par des méthodes nourricières ou d’injection. Le test Click-iT peut être utilisé avec BrdU dans des expériences à double impulsion en utilisant l’anticorps ant-BrdU (clone MoBu-1), qui ne réagit pas de manière croisée avec EdU. La technologie Click-iT est compatible avec l’immunohistochimie, l’immunocytochimie et les colorants fluorescents qui tolèrent la fixation ou qui sont conçus pour le marquage fixe des cellules.

Analyse cellulaire, cycle cellulaire, prolifération cellulaire, viabilité cellulaire, prolifération et fonction, imagerie cellulaire, réplication et réparation de l’ADN, criblage à haut contenu (HCS)