Invitrogen™ Di-4-ANEPPS

Les augmentations et diminutions du potentiel de la membrane (appelées respectivement hyperpolarisation et dépolarisation membranaires) jouent un rôle central dans de nombreux processus physiologiques, notamment la propagation des impulsions nerveuses, la contraction musculaire, la signalisation cellulaire et la synchronisation du canal ionique. Les sondes potentiométriques sont des outils importants pour étudier ces procédés.

• Ce sont des sondes à réponse rapide qui fonctionnent au moyen de changements dans leur structure électronique et, par conséquent, leurs propriétés de fluorescence, en réponse aux changements qui surviennent dans le champ électrique environnant.
• Leur réponse optique est suffisamment rapide pour détecter les changements potentiels transitoires (en millisecondes) dans les cellules excitables, y compris les neurones uniques, les cellules cardiaques et les cerveaux intacts
• Toutefois, l’amplitude de leur changement de fluorescence dépendant du potentiel est souvent faible ; les sondes à réponse rapide affichent généralement un changement de fluorescence entre 2 et 10 % par tranche de 100 mV
• De plus, ces colorants affichent le décalage dépendant du potentiel dans leur spectre d’excitation, ce qui permet ainsi de quantifier le potentiel membranaire à l’aide de mesures du rapport d’excitation
• La molécule zwitterionique présente la réponse potentiométrique la plus constante dans différents types de cellules et de tissus
• Le maxima Ex / Em lié aux membranes phospholipides modèles sont d’environ 465 / 635 nm (mais les propriétés spectrales dépendent fortement de l’environnement)
• Non fluorescent jusqu’à ce qu’il soit lié aux membranes
• Soluble dans : éthanol, DMSO et DMF
• Le colorant est introduit dans les cellules en ajoutant directement la solution mère au milieu de culture cellulaire, à l’aide d’un marquage rétrograde
• Sonde à réponse rapide, adaptée à la détection des changements de potentiel membranaire en sous-millisecondes
• La membrane plasmique de la cellule présente un potentiel transmembranaire d’environ -70 mV (négatif à l’intérieur) en raison des gradients de concentration en K+, Na+ et Cl- maintenus par des processus de transport actifs
• Les sondes potentiométriques offrent une méthode indirecte pour détecter la translocation de ces ions

Analyse cellulaire, métabolisme cellulaire, structure cellulaire, viabilité, prolifération et fonction cellulaires, membranes (générales) et lipides