Thermo Scientific™ North2South™ Biotin Random Prime DNA Labeling Kit

Description

Le kit de biotinylation d’ADN à amorce aléatoire Thermo Scientific™ North2South utilise des heptanucléotides aléatoires, des fragments Klenow et des nucléotides avec biotine pour produire des modèles d’ADN biotinylé pour l’hybridation et des méthodes de détection d’ADN.

Les heptanucléotides aléatoires contenant toutes les séquences possibles sont fixés sur un modèle d’ADN dénaturé. Ils agissent comme amorces pour la synthèse de brins complémentaires par l’ADN polymérase. Les dNTPs biotinylés dans le mélange de réaction sont incorporés dans l’ADN nouvellement synthétisé. Ce protocole produit l’ADN marqué à la biotine de haute activité pour utilisation comme sondes dans les expériences d’hybridation telles que Southern et Northern. Les hybrides qui en résultent peuvent être détectés avec la peroxydase de streptavidine-raifort (HRP).

Points clés :

• Sensibilité maximales : marquages avec le dUTP biotinylé, ce qui optimise la liaison streptavidine-HRP et augmente la sensibilité
• Fonctionne avec seulement 100 ng de modèle d’ADN de départ.
• Le fragment Klenow sans exonucléases produit des rendements plus élevés.
• Chaque réaction donne une sonde suffisante pour environ trois (10 x 10 cm) transferts.