Thermo Scientific™ Pierce™ Magnetic RNA-Protein Pull-Down Kit

Le kit de pull-down magnétique des complexes ARN-protéine comprend des réactifs pour réaliser avec une grande efficacité des enrichissements en protéines de liaison à l’ARN (RBP) à l’aide de molécules d’ARN marquées à leur extrémité à la desthiobiotine et de microbilles magnétiques couplées à la streptavidine. Le kit complet contient suffisamment de réactifs pour 20 réactions de marquage de l’ARN et 20 pull-downs de complexes ARN-protéine. Ce système d’enrichissement direct en complexes ARN-protéine constitue une alternative aux techniques de capture par anticorps de complexes protéine-ARN ou de groupes incorporés dans l’acide nucléique. Un autre avantage du kit est qu’il comprend des contrôles validés pour le marquage et le pull-down. Les échantillons préparés avec le kit sont directement utilisables pour l’analyse par différentes techniques, notamment le western blot et la spectrométrie de masse (MS).

Points clés :

• Direct : capture des complexes ribonucléoprotéiques directement avec l’ARN marqué à son extrémité ; n’utilise pas et n’a pas besoin d’anticorps pour l’extraction

• Facile à utiliser : enrichissement des RBP sans godets de centrifugation ni aucune centrifugation ; procédure optimisée pour réduire au minimum le temps opérateur (moins de 3 heures) après la réaction de marquage de l’ARN

• Flexible : utilisez de l’ARN transcrit in vitro ou de l’ARN synthétique pour le marquage de longueurs et de complexité diverses ; protéines enrichies avec succès à l’aide de lysats traduits endogènes, surexprimés et in vitro

• Spécifique : faible bruit de fond dû aux microbilles ; l’ARN non apparenté ou muté n’enrichit pas de manière significative les RBP spécifiées

• Économique : solution moins chère que l’achat séparé d’ARN marqué à l’extrémité synthétique, de microbilles magnétiques et de réactifs

• Complet : contient un module de marquage et un module d’enrichissement avec les tampons nécessaires pour le dosage ; ARN de contrôle positif, ARN de contrôle négatif et anticorps anti-RBP inclus

Comprend :

Kit complet comprenant le kit de desthiobiotinylation de l’extrémité 3’ de l’ARN Pierce, des contrôles ARN positif et négatif, des microbilles magnétiques de streptavidine compatibles avec les acides nucléiques et des tampons pour l’enrichissement et l’élution des RBP

Matériel nécessaire :

L’ARN et le lysat sont à fournir par l’utilisateur (échantillon expérimental)

Recommandé dans les cas suivants :

• Analyse mutationnelle
• Analyse des fonctions structurelles
• Identification de l’ARN : interactions protéiques
• Analyse MS de l’ARN inconnu : paires ou complexes de liaison protéique