Invitrogen™ ProcartaPlex™ Human Inflammation Panel, 20plex

Le panneau d’inflammation humain 20-Plex ProcartaPlex permet l’exploration de la fonction immunitaire en analysant 20 cibles protéiques dans un seul puits à l’aide de la technologie Luminex xMAP. L’effet global d’une réponse inflammatoire est dicté par l’équilibre entre les médiateurs pro- et anti-inflammatoires. Les cytokines pro-inflammatoires telles que l’IL-1 bêta, l’IL-6 et le TNF alpha sont responsables des réponses précoces et amplifient les réactions inflammatoires, alors que les cytokines anti-inflammatoires, qui comprennent l’IL-4, l’IL-10 et l’IL-13, ont l’effet inverse en limitant les réactions inflammatoires. Un état hyperinflammatoire non régulé peut conduire à un ‘‘choc cytokinique’’, également appelé syndrome de libération de cytokines (SLC). La complexité croissante des réseaux de cytokines et de chimiokines pro- et anti-inflammatoires fait qu’il était essentiel de les examiner au sein de groupes fonctionnels pertinents plutôt qu’individuellement.

Les panneaux préconfigurés ProcartaPlex sont largement testés pour la combinabilité, l’interférence et la réactivité croisée des analyses afin de fournir le plus haut niveau de validation et de précision. Tous les panneaux ProcartaPlex sont fournis avec les réactifs nécessaires pour effectuer le dosage.

Les panneaux multiplex ProcartaPlex sont disponibles en plusieurs formats et peuvent être utilisés sur six espèces (humain, souris, rat, primate non humain, porcin et canin).

Liste de cibles [région de microbille] :
Cytokines : GM-CSF [44], IFN alpha [48], IFN gamma [43], IL-1 alpha [62], IL-1 bêta [18], IL-4 [20], IL-6 [25], IL-8 [27], IL-10 [28], IL-12p70 [34], IL-13 [35], IL-17A (CTLA-8) [36], TNF alpha [45]
Chimiokines : IP-10 (CXCL10) [22], MCP-1 (CCL2) [51], MIP-1 alpha (CCL3) [12], MIP-1 bêta (CCL4) [47]
Adhérence cellulaire et réponse inflammatoire : ICAM-1 [73], CD62E (sélectine E) [77], CD62P (sélectine P) [55]

À propos des dosages ProcartaPlex pour la plateforme Luminex
Les immunodosages ProcartaPlex, basés sur les principes d’un ELISA en sandwich, utilisent deux anticorps hautement spécifiques se liant à différents épitopes d’une protéine pour quantifier simultanément toutes les cibles protéiques à l’aide d’un instrument Luminex. Les dosages multiplex ProcartaPlex nécessitent seulement seulement 25 μl de plasma ou de sérum, ou 50  μl de surnageant de culture cellulaire, et seulement quatre heures pour obtenir les résultats analysés.

Caractéristiques :
• Résultats reproductibles et fiables — validés en panneau selon la norme la plus élevée de l’industrie, avec des tests de combinabilité des cibles protéiques et de réactivité croisée
• Plus de résultats par échantillonneur — permet de réaliser simultanément plusieurs cibles protéiques dans un seul échantillon de 25 – 50 μl
• Plate-forme de multiplexage à haute référence avec la technologie bien établie Luminex, pour la détection et la quantification des protéines

Les dosages ProcartaPlex utilisent Luminex xMAP (profilage multianalyte) Technologie pour la détection et la quantification simultanées de jusqu’à 80 cibles protéiques dans un seul échantillon de 25–50 μl — de plasma, de sérum, de surnageant de culture cellulaire et d’autres liquides corporels.

Les microbilles Luminex dans le dosage ProcartaPlex sont colorées en interne avec des proportions précises de fluorophores rouges et IR pour créer des signatures uniques de façon spectrale qui peuvent être identifiées par les systèmes de détection Luminex xMAP (par exemple Luminex 200, FLEXMAP 3D et MAGPIX). Comme le dosage ELISA sandwich, le dosage ProcartaPlex utilise des paires d’anticorps appariées pour identifier la protéine d’intérêt. Dans un dosage multiplexé, chaque microbille unique de façon spectrale est marquée avec des anticorps spécifiques pour une seule protéine cible et les protéines liées sont identifiées avec des anticorps biotinylés et de la streptavidine–R-phycoérythrine (RPE). La conjugaison d’anticorps spécifiques d'une protéine à une microbille distincte permet d’analyser plusieurs cibles dans un seul puits.

La différence la plus significative entre un dosage ProcartaPlex et un dosage ELISA est que l’anticorps de capture du dosage ProcartaPlex est conjugué à une microbille et n’est pas adsorbé par un des puits de la microplaque. Ainsi, les réactifs de dosage ProcartaPlex flottent librement dans la solution. Pour la détection, l’instrument Luminex 200, par exemple, contient deux lasers : un pour distinguer la signature spectrale de chaque microbille et un autre pour quantifier la quantité de fluorescence de la RPE. Cette dernière est proportionnelle à la quantité de protéine présente dans l’échantillon. Les dosages multiplex ProcartaPlex peuvent profiler plus de protéines cibles à l’aide d’un échantillon nettement moins important. Cela leur prend autant de temps que pour effectuer un dosage ELISA sandwich traditionnel.

Les panneaux multiplex ProcartaPlex sont disponibles en plusieurs formats et peuvent être utilisés sur six espèces (humain, souris, rat, primate non humain, porcin et canin).