Thermo Scientific™ GeneJET FFPE DNA Purification Kit

Le kit utilise une technologie de membrane à base de silice sous la forme d’une colonne à centrifuger pratique, éliminant l’utilisation de résines coûteuses, d’extractions de phénol-chloroforme toxique ou de précipitations alcooliques chronophages. La procédure standard s’effectue en moins de 20 minutes après la lyse cellulaire et génère de l’ADN purifié d’une taille supérieure à 30 kpb. L’ADN isolé peut être employé directement pour la PCR, le transfert Southern et les réactions enzymatiques.

Les échantillons de tissus fixés à la formaline et intégrés à la paraffine (FFPE) sont préparés régulièrement à partir d’échantillons de tissus chirurgicaux humains, ce qui permet de les conserver dans des archives pendant des années. Le kit Thermo Scientific GeneJET de purification d’ADN FFPE est conçu pour une purification d’ADN rapide et pratique à partir de diverses quantités de tissus FFPE archivés. Jusqu’à 8 sections (10 μm d’épaisseur) d’échantillons de FFPE provenant de divers tissus peuvent être utilisées pour l’extraction d’ADN génomique sans incubation de nuit. L’élimination des réactifs toxiques couramment utilisés pour la déparaffinisation (c’est-à-dire le xylène) permet une procédure de purification d’ADN sûre avec des rendements élevés d’ADN et une excellente qualité. Chaque préparation récupère jusqu’à 8 μg d’ADN génomique pouvant être élué en volumes de 20 μl, ce qui permet de prélever des échantillons concentrés. En raison de l’efficacité de déréticulation élevée, l’ADN purifié de haute qualité affiche des performances fiables dans des applications sensibles en aval telles que qPCR, PCR (amplicons jusqu’à 1 kb) ou préparation de bibliothèques NGS.
Points forts
•ADN de haute qualité : convient à la PCR et à la qPCR
•Rapide : la procédure peut être achevée en 2 heures
•Sûr : solvants non toxiques
•Efficace : produit jusqu’à 8 μg d’ADN purifié
Applications
• Préparation de bibliothèque NGS pour PCR
• qPCR
•
comprend
• Solution de Protéinase K
• Solution de RNase A
• Tampon de digestion
• Tampon de liaison
• Tampon de nettoyage I (conc.)
• Tampon de nettoyage II (conc.)
• Tampon d’élution
• Colonnes de purification d’ADN GeneJET & Tubes de prélèvement
• Tubes de prélèvement
• Protocole détaillé

Danger : Non
>Contrôle qualité :
>•le kit de purification d’ADN génomique GeneJET est qualifié en isolant l’ADN génomique de 200 μl de sang et de 5 mg de tissus de mammifères conformément aux protocoles recommandés.
>• L’ADN génomique purifié présente un rapport A_{260 / 280} de ≥ 1,7.
>•Une seule bande de plus de 30 kb est observée après l’électrophorèse sur gel d’agarose et la coloration au bromure d’éthidium.
>• L’ADN génomique purifié est évalué par amplification par PCR d’un gène à copie unique et digestion avec des enzymes de restriction FastDigest.
> Conditions de conservation : température ambiante

L’ADN génomique isolé est idéal dans les procédures courantes de biologie moléculaire, y compris : PCR et qPCR, FastDigest et digestion par restriction traditionnelle, transfert Southern.