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Thermo Scientific™ Uracile-ADN glycolase, thermolabile
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Quantité:
100 U
Conditionnement:
100 unités
Description
Uracil-DNA Glycosylase excises uracil from dU-containing DNA by cleaving the N-glycosidic bond between the uracil base and the sugar backbone. This cleavage generates alkali sensitive apyrimidinic sites that are blocked from replication by DNA polymerase or prevented from becoming a hybridization site.
- L’uracile-ADN glycosylase retire l’uracile de l’ADN contenant du dUTP en clivant la liaison N-glycosidique entre la base de l’uracile et la base essentielle du sucre. Ce clivage génère des sites apyrimidiniques sensibles aux alcalis qui sont bloqués par la réplication par l’ADN polymérase ou empêchés de devenir un site d’hybridation.
- Les ADN double brin et simple brin qui contiennent du dU sont des substrats de l’uracile-ADN glycolase, alors que l’ARN et l’ADN normal contenant du dT n’en sont pas.
- L’uracile-ADN glycolase peut également être utilisée pour augmenter l’efficacité de clonage des produits de PCR ayant des amorces contenant du dU qui y sont intégrés et pour augmenter l’efficacité de la mutagénèse dirigée.
- L’uracile-ADN glycolase dérivée de Gadus morhua possède tous les attributs de l’enzyme dérivée de E. coli, avec l’avantage supplémentaire d’être thermolabile. Elle est complètement et irréversiblement inactivée après 10 minutes d’incubation à 50°C.
- L’enzyme est purifiée par chromatographie et testée pour détecter les endonucléases et les exonucléases contaminantes.
- 50 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 100 mM de NaCl, 0,5 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,1 % de Triton X-100, 50 % de glycérol.
- Le Reaction Mix contient 70 mM de Tris-HCl, pH 8,0, 10 mM de NaCl, 1 mM d’EDTA, 100 µg/mL de BSA, de l’ADN marqué au 3H-dUTP et de l’uracile-ADN glycolase. L’incubation s’effectue à 37°C pendant 1 heure.
- Une unité correspond à la quantité d’enzyme nécessaire pour libérer 1 nmol d’uracile d’ADN contenant du dU en une heure à 37°C.
- 1 unité/µL
- Étude de la réparation de l’ADN et de la détection des mutations.
- Amélioration de l’efficacité de clonage des produits de PCR.
- Augmentation de l’efficacité de la mutagénèse dirigée.
- Étude des interactions protéine-ADN.
Spécification
Spécification
| Contenu et stockage | Expédié sur de la glace sèche. Stockage à -20°C. |
| Enzymes | Glycosylase |
| Tampon compatible | Tampon de stockage |
| Quantité | 100 U |
| Type de produit | Uracile-ADN glycosylase |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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