Histologie

Dans le processus d'inclusion, les échantillons de tissus dans leurs cassettes et le matériau d'inclusion liquide (tel que la cire de paraffine) sont placés dans des moules et durcis. Les blocs durcis contenant les échantillons de tissus sont alors prêts à être sectionnés. L'inclusion peut également être réalisée en utilisant des tissus congelés, non fixés, dans un milieu à base d'eau, généralement un glycol ou une résine à base d'eau.

Lors de la phase de sectionnement, le tissu est découpé en tranches très fines (3-5µm ; 1000µm = 1mm) à l'aide d'un microtome. Ces coupes, généralement plus fines que la cellule moyenne, sont ensuite placées sur une lame de verre pour être colorées. Les tissus congelés, inclus dans un milieu de congélation, sont coupés au moyen d'un microtome dans un cryostat.

Les colorations de routine sont effectuées pour donner du contraste au tissu examiné. L'hématoxyline et l'éosine (H et E) sont les colorants les plus couramment utilisés en histologie.

L'hématoxyline est combinée à un mordant métallique, tel que l'aluminium, et le complexe hématoxyline-aluminium est utilisé pour colorer les noyaux cellulaires en bleu/noir. L'éosine est la contre-coloration la plus utilisée dans la coloration de routine des coupes de tissus. La meilleure coloration avec l'éosine se produit à un pH de 4,5 à 5 et, lorsqu'elle est utilisée correctement, de multiples nuances de rose peuvent être obtenues. Les érythrocytes, le collagène et le cytoplasme des cellules épithéliales ou musculaires doivent se colorer en différentes teintes de rose lors de l'utilisation de l'éosine. Après la coloration, les coupes doivent être montées pour protéger l'échantillon, ce qui nécessite l'utilisation d'un milieu de montage et d'une lamelle couvre-objet.