Thermo Scientific™ BseXI (BbvI) (3 U/μL)

Description

Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.

5’...G C A G C (N)₈▵...3’

3’...C G T C G (N)₁₂▵...5’

Conditions pour une activité de 100 % :

• Tampon 1X BseXI : 50 mM de Tris-HCl (pH 7,5 à 37°C), 2 mM de MgCl₂, 100 mM de NaCl et 0,1 mg/ml de BSA
• Laissez incuber à 65°C
• Pour assurer une digestion plus efficace, effectuez la réaction de clivage sous huile de paraffine.

Tampon de stockage :

• BseXI est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,4 à 25°C), 200 mM de NaCl, 1 mM de DTT, 1 mM d’EDTA, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol

Ligature et clivage :

• Après une surdigestion 10 fois supérieure avec BseXI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés.

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• CpG : possibilité de chevauchement — aucun effet.
• EcoKI : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• EcoBI : possibilité de chevauchement — effet non déterminé.

Remarque :

Dosé à l’aide d’ADN pBR322 (# SD0041). L’incubation à 37°C se traduit par une activité de 10%. Une surdigestion 40 fois supérieure avec BseXI peut induire une activité Star. BseXI peut rester associé à l’ADN clivé. Cela peut provoquer un décalage de la bande d’ADN pendant l’électrophorèse. Pour éviter des modèles atypiques de bandes d’ADN, utilisez le colorant de charge d’ADN 6X et une solution SDS pour la préparation des échantillons, ou chauffer l’ADN digéré en présence de SDS avant l’électrophorèse.