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Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing, with One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R E. coli

Permet une stratégie de clonage très efficace en une seule étape et en 5 minutes (“Clonage TOPO”) pour l’insertion directe de produits PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de séquençage

Marque:  Invitrogen™ K459540

928.04 EUR valable jusqu'au 2024-03-29
Utilisez le code promo "21615" pour bénéficier de cette offre.



Code nomenclature Nacres: NA.31

Informations supplémentaires : Poids : 0.14000kg

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Code produit. 10226862

  • 1392.00€ / 1 pièce
Expédition estimée: 22-04-2024
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Includes: Vecteur PCR™4-TOPO™ activé par la topoisomérase I ; tampon PCR ; solution saline ; dNTPs ; modèle de contrôle ; amorces T3, T7, amorces M13 avant et M13 antisens ; amorces PCR de contrôle ; eau stérile ; One Shot™ Chemically Competent ou Électrocomp™ E. coli ; milieu S.O.C. ; 19 plasmide de contrôle pUC superenroulé

Description

Description

Ces kits incluent tout ce qui est nécessaire pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix. Chaque kit utilise le vecteur TA pCR4-TOPO avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui donnent plus de séquence d’insertion et moins de séquence de vecteur pour chaque réaction.
Vecteur TA pCR4-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Nous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4- TOPO pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO comprend des sites pour quatre amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation de clones TA pCR4-TOPO
Le vecteur TA pCR4-TOPO contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour une sélection positive et une sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer avec les cellules compétentes E. coli fournies.
Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR4-TOPO utilisé dans ce kit est livré avec des saillies de 3’T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés Taq avec des saillies de 3’A.
La norme du clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Kits de séquençage TOPO TA Cloning - Options de kit
Le kit de séquençage TOPO TA Cloning peut être acheté avec diverses cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins :

  • Clonage général : TOP10 (No de catalogue K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
  • Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4580-01, K4580-40)
  • Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K4595-01, K4595-40)
  • Croissance rapide : Mach1™-T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4530-20)
Une version du kit qui inclut un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink™ (No de catalogue K4575-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage est également disponible.

  • Obtenez plus de séquences : permet d’augmenter la séquence d’insert et de réduire la séquence de vecteur lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
  • Simplicité et rapidité : passez de la PCR aux clones en trois étapes en un temps de manipulation inférieur à 5 minutes
  • Efficacité : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
  • Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
Kits TOPO TA Cloning pour séquençage - Présentation des kits
  • VECTEUR : vecteur TA pCR4-TOPO : Vecteur de clonage optimisé pour des résultats de séquençage améliorés
  • Méthode de clonage : TOPO TA Cloning : topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec des saillies de 3’A (amplification Taq) sur le vecteur
  • Cellules compétentes : Plusieurs options : faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide

Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de la méthylation, clonage PCR, ARNi, recherche sur l’épigénétique et l’ARN non codant, séquençage de l’ADN traité par bisulfite

Spécification

Spécification

DH5α
Boîte 1 :
• Vecteur pCR4-TOPO™ activé par topoisomérase I
• Tampon PCR
• Solution saline
• dNTPs
• Modèle de contrôle
• Amorces directes T3, T7, M13 et inversées M13
• amorces pour PCR de contrôle
• Eau stérile

Stockez de -5 à -30°C.
Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.

Encadré 2 :
• Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™
• Milieu S.O.C.
• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé

Stockez entre -68 et -85°C.
Biologie de la chromatine
Kit de clonage
50 réactions
TOPO™-TA
Kit
One Shot™
T7, T3
Vecteurs de clonage TOPO-TA
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