Invitrogen™ Kit de dosage de coactivateur TR-FRET CAR LanthaScreen™, lapin

Description

Ce kit contient de l’anticorps Tb anti-GST de lapin ; Les autres composants du kit sont identiques à ceux du kit PV4836 :

Le dosage de coactivateur du récepteur d’androstane constitutif (CAR) TR-FRET LanthaScreen™ fournit une méthode sensible et robuste pour la sélection à haut débit (HTS) des ligands CAR potentiels comme agonistes du recrutement de coactivateur dépendant du ligand ou des agonistes inverses du déplacement de coactivateur dépendant du ligand. Le kit utilise un anticorps anti-GST marqué au terbium, un peptide coactivateur marqué à la fluorescéine et un domaine de liaison au ligand CAR (CAR-LBD) qui est marqué avec la glutathion-S-transférase (GST) dans un format de dosage homogène en mélange et en lecture.

Pour doser :
Lors de l’exécution du dosage de coactivateur de CAR TR-FRET LanthaScreen™, le CAR-LBD est ajouté aux composés d’essai de ligand, suivi de l’ajout d’un mélange du peptide coactivateur fluorescéine et de l’anticorps anti-GST de terbium. Après une période d’incubation à température ambiante, le rapport TR-FRET 520 nm / 495 nm est calculé et peut être utilisé pour déterminer l’EC50 à partir d’une courbe de réponse de dose du composé. Basé sur la biologie de l’interaction du peptide coactivateur-CAR, cet EC50 de ligand est une valeur composite représentant la quantité de ligand nécessaire pour se lier au récepteur, effectuer un changement conformationnel et recruter ou déplacer le peptide coactivateur (figures 1 et 2).