Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR delta Coactivator Assay Kit, goat

Description

Ce kit contient de l’anticorps anti-Tb-GST de chèvre ; les autres composants du kit sont identiques à ceux du kit A15134 :

le dosage de coactivateur delta LanthaScreen™ TR-FRET PPAR (récepteur activé par le proliférateur de peroxysomes) offre une méthode sensible et robuste pour le criblage à haut débit des ligands delta PPAR potentiels en tant qu’agonistes du recrutement de coactivateur dépendant des ligands. Le kit utilise un anticorps anti-GST marqué au terbium (Tb), un peptide coactivateur marqué à la fluorescéine et un domaine de liaison au ligand delta PPAR recombinant humain (PPAR delta-LBD) marqué à la glutathion-S-transférase (GST), dans un format de dosage homogène en mélange et en lecture.

Lors de l’exécution™ du dosage du coactivateur delta TR-FERT PPAR LanthaScreen en mode agoniste (pour identifier les composés agonistes), le PPAR delta-LBD est ajouté aux composés du dosage des ligands, suivi de l’ajout d’un mélange de peptide coactivateur marqué à la fluorescéine et d’anticorps anti-GST marqué au Tb. Après une période d’incubation à température ambiante, le rapport TR-FRET 520 /495 est calculé et utilisé pour déterminer l’EC50 à partir d’une courbe de réponse de dose du composé. Basé sur la biologie de l’interaction du peptide coactivateur delta PPAR, ce ligand EC50 est une valeur composite représentant la quantité de ligand nécessaire pour se lier au récepteur, effectuer un changement conformationnel et recruter un peptide coactivateur (voir figure 1).

Contenu et conservation :
le kit de dosage de coactivateur delta PPAR TR-FRET LanthaScreen™ contient une protéine PPAR delta-LBD (GST), un peptide coactivateur marqué par fluorescence, un anticorps anti-Tb-GST et des tampons. Conserver les composants comme indiqué dans le protocole de dosage (-80°C, -20°C ou 4°C).