Macherey-Nagel™ Isolement d’ARN, tampon de lyse RA1, Macherey-Nagel™

Les cellules sont lysées par incubation dans une solution contenant des ions chaotropiques. Ce tampon de lyse désactive les RNases créant des conditions de liaison appropriées favorisant l'adsorption de l'ARN sur la membrane de silice. Après la lyse, une homogénéisation et une réduction de la viscosité sont réalisées par filtration avec des unités de filtration NucleoSpin™. L'ADN contaminant lié à la membrane est éliminé par une solution DNase I directement appliquée à la membrane pendant la préparation. Les conditions optimales pour la DNase sont obtenues en lavant la membrane avec un tampon de dessalage spécifique avant le traitement. Les sels, métabolites et composants cellulaires macromoléculaires sont éliminés par simple lavage avec deux tampons différents. L'ARN total est finalement élué avec de l'eau exempte de RNase. Le kit d'ARN végétal NucleoSpin™ comporte deux tampons de lyse alternatifs : dans la plupart des cas, l'utilisation du tampon RA1 est recommandée pour la lyse en raison de ses propriétés de dénaturation fortes. La présence de métabolites particuliers dans une variété de tissus végétaux ou de champignons peut conduire à la solidification du lysat, avec pour résultat une suspension non traitable. Dans de tels cas, le tampon alternatif RAP est le tampon de choix. Pour une homogénéisation complète et une réduction de la viscosité du lysat, des unités de filtration NucleoSpin™ sont également fournies. Composants du kit : Colonnes d'ARN NucleoSpin™ avec tubes de prélèvement de 2 ml, tubes de prélèvement de 2 ml, microtubes à centrifuger de 1,5 ml, filtres NucleoSpin™, tampons, DNase I exempte de RNase, tampon de réaction pour la DNase I, eau exempte de RNase.

• Technologie à membrane de silice
• Rendement : 3μ g à 70μ g issu de 100μ g de matière végétale
• Échantillons : 1 mg à 100 mg de tissu
• Volume d’élution : 60 μL
• Taille du fragment : 200 b à 20 kb
• Capacité de liaison : 200 μg
• Temps de préparation : 30 min/6 préparations
• Format : mini colonne de centrifugation
• DNase I incluse
• Colonnes de filtration NucleoSpin incluses pour l'homogénéisation du lysat et la réduction de la viscosité
• Purification parallèle de l'ADN possible grâce à l'ensemble de tampons NucleoSpin ARN/ADN Le kit d’ARN végétal NucleoSpin™ est conçu pour l'isolement de l'ARN de haute qualité exempt d'ADN à partir d'une grande variété d'échantillons végétaux et fongiques.