Thermo Scientific™ pT7CFE1-CGST-HA-His Vector for Mammalian Cell-Free Protein Expression

Description

Les vecteurs d’expression sans cellule T7 (pT7CFE1) Thermo Scientific™ clonent des plasmides optimisés pour une utilisation avec le système d’expression protéique in vitro humaine en 1 étape Thermo Scientific pour la traduction &italic_begin;in vitro&italic_end; (IVT) de protéines hybrides “taguées”.

Les vecteurs d’expression pT7CFE1 contiennent l’élément du site d’entrée interne des ribosomes (IRES) du virus de l’encéphalomyocardite (EMCV) qui est essentiel pour des niveaux élevés d’expression protéique indépendante du bouchon dans le système de traduction in vitro humain. Chaque vecteur est doté d’un site de clonage multiple (MCS) hautement compatible pour faciliter l’insertion de séquences de codage protéique dans et entre les vecteurs. Le vecteur pT7CFE1 est disponible avec des “tags” d’affinité uniques ou en tandem au niveau des extrémités N ou C pour faciliter la purification et la détection des protéines. Les vecteurs pT7CFE conviennent pour l’insertion de gènes clonés, d’ADNc, d’ORF ou de produits de PCR afin de réaliser une transcription et une traduction in vitro. Des services de clonage personnalisés sont également disponibles.

Points clés :

• Performances optimisées – conçues pour offrir le rendement le plus élevé dans le système de traduction in vitro humain

• Nombreuses options – plusieurs options de marquage et de localisation des marqueurs

• MCS modulaires – le site de clonage multiple est maintenu dans l’ensemble de la famille de vecteurs pour faciliter le sous-clonage

• Marqueurs divisibles – site de clivage3D du HRV disponible sur certains vecteurs

Caractéristiques du plasmide PT7CFE1 :

• EMCV IRES au niveau de l’UTR 5’ favorise la traduction d’ARNm haut niveau
• Le MCS s’adapte à l’insertion de gènes grâce à dix sites de restriction différents : Msc1, Nde1, BamH1, EcoR1, EcoRV, Pac1, Pst1, Sac1, Sal1, Not1 et Xho1
• La séquence Poly A dans la région 3’ favorise la stabilisation de l’ARNm et sa protection contre les nucléases
• Le terminateur T7 assure la synthèse de transcrits d’ARNm ayant une taille correcte
• La linéarisation plasmidique peut être réalisée avec des sites de restriction entre la séquence Poly A et la région du terminateur T7