Thermo Scientific™ TMTsixplex™ Isobaric Mass Tagging Kit

Description

Les kits et réactifs de marquage de masse isobare Thermo Scientific™ TMT réactifs aux amines permettent un marquage quantitatif des protéines extraites de cellules et de tissus pour l’identification et l’analyse par spectrométrie de masse.

Les réactifs Tandem Mass Tag™ 6-plex (TMTsixplex™) sont des ensembles de composés isobares (c’est-à-dire de même masse et de même structure, également appelés isotopomères) qui sont activés par NHS pour le marquage covalent et irréversible des groupes amines primaires (–NH2). Chaque réactif isobare contient un nombre différent d’isotopes lourds dans la région du rapporteur de masse, ce qui donne une masse de rapporteur unique pendant la MS / MS en tandem pour l’identification et la quantification relative des échantillons. Les kits et réactifs de marquage de masse isobare Thermo Scientific TMT, réactifs réagissant aux amines, permettent la quantification multiplex de protéines extraites de cellules et de tissus provenant de 6 échantillons au maximum, par spectrométrie de masse en tandem.

Caractéristiques des réactifs et kits de marquage TMTsixplex :
• Puissant—l’analyse MS multiplexée augmente le débit des échantillons et permet la quantification relative d’un maximum de six échantillons différents provenant de cellules, de tissus ou de fluides biologiques
• Fiable—une chimie cohérente permet de passer efficacement du développement de méthodes à la quantification multiplex, ce qui facilite la recherche sur la découverte de biomarqueurs.
• Efficace—les réactifs activés par l’ester NHS réactif aux amines garantissent un marquage de plus de 95 % de tous les peptides, quelle que soit la séquence de la protéine ou la spécificité de l’enzyme protéolytique
• Compatible—optimisé pour une utilisation avec les plateformes Thermo Scientific Orbitrap MS/MS à haute résolution, l’analyse des données étant entièrement prise en charge par Proteome Discoverer™ 2.3 et versions plus récentes

Applications des réactifs et kits de marquage TMTsixplex :
• Identification et quantification des protéines à partir de multiples échantillons de cellules, de tissus ou de liquides biologiques
• Profilage de l’expression des protéines entre l’état normal et l’état pathologique ou entre le contrôle et le traitement
• Analyse quantitative des protéines pour lesquelles aucun anticorps n’est disponible
• Identification et quantification des protéines membranaires et des protéines modifiées au niveau post-translationnel
• Identification et quantification de centaines ou de milliers de protéines en une seule expérience

Sachant que les réactifs TMT ont une structure et une masse identiques (c’est-à-dire des isotopomères), les peptides marqués coéluent pendant la séparation LC et sont co-isolés pendant l’analyse MS/MS, ce qui réduit le nombre d’identifications de peptides manquants dans les échantillons. Lors de l’analyse MS/MS, chaque tag isobare est également fragmenté pour produire une masse d’ion rapporteur unique, qui est utilisée pour l’identification et la quantification des échantillons. La quantification des protéines est réalisée en comparant les intensités relatives des six ions rapporteurs.

Les réactifs TMT sont fournis sous forme de kits autonomes ou de kits optimisés contenant tous les réactifs et contrôles nécessaires pour optimiser la flexibilité, la commodité et la fiabilité. Les réactifs Tandem Mass Tag combinés aux instruments Thermo Scientific Orbitrap à haute résolution et au logiciel Proteome Discoverer constituent des solutions intégrées pour l’analyse quantitative de l’expression des protéines. Pour l’analyse haute résolution des peptides marqués au TMT, la colonne LC recommandée pour la source Nanospray Flex est la colonne Acclaim PepMap 100 C18 LC (réf. nº 164942-164939) Pour la source EASY-Spray, la colonne LC recommandée est la colonne LC EASY-Spray C18 (n° de référence ES902 ou ES903).