Invitrogen™ Kit d’ADN de donneur TrueTag™, 6xHis

Description

• Une solution rapide pour le marquage de gènes à haute efficacité (jusqu’à 100 % de cellules modifiées) avec de l’ADN de donneur prêt à la transfection pour les expériences de modification du génome
• Le kit fournit tout le nécessaire pour produire un donneur d’ADN de haute qualité pour marquer le gène avec un marqueur de sélection et de 6xHis
• Il suffit de fournir deux amorces spécifiques au locus pour ajouter des bras d’homologie, amplifier par PCR et purifier pour un donneur prêt à la transfection en quelques heures, et non plusieurs jours
• Amplification par PCR en une étape pour générer un modèle de donneur : aucun clonage requis
• Enrichir jusqu’à 100 % de cellules marquées au 6xHis

Chaque kit est conçu pour permettre aux utilisateurs de :

• Marquer l’extrémité carboxy-(C-) ou amino-(N-) de votre gène d’intérêt
• Choisir les marqueurs de sélection de la puromycine ou de la blasticidine : selon ce qui convient le mieux au modèle cellulaire
• Éliminer facilement les marqueurs de résistance aux antibiotiques avec du Cre / Lox après l’enrichissement cellulaire

Le kit inclut les composants suivants :

• Quatre modèles de donneur linéaires : Résistance à la puromycine / N-terminale, résistance à la blasticidine / N-terminale, résistance à la puromycine / C-terminale, résistance à la blasticidine / C-terminale
• Master Mix PCR haute fidélité Phusion Flash
• Colonnes et tampons de purification par PCR
• Amorces de contrôle positif pour marquer la bêta-actine humaine (ACTB)

Logiciel intuitif permettant de concevoir rapidement des réactifs spécifiques aux gènes

Les réactifs de modification de gènes spécifiques à la cible sont requis pour une bonne activation de votre marqueur fluorescent. Le logiciel Web Invitrogen TrueDesign Genome Editor effectue le travail de conception pour vous :

1. Identifier le transcript du gène cible
2. Désigner le site d’insertion
3. Concevoir et activer la commande facile de tous les composants nécessaires

Réactifs requis disponibles via le logiciel TrueDesign (non inclus dans le kit) :

• L’ARN guide CRISPR ou les TALEN conçus à côté de l’extrémité N ou C-terminale
• Oligos pour PCR :amplifiez le donneur et ajoutez les bras d’homologie appropriés
• Amorces de séquençage pour l’évaluation de l’efficacité du clivage CRISPR-Cas9
• Amorces de vérification pour valider l’insertion correcte du donneur d’ADN TrueTag

Également requis et disponibles à l’achat séparément ou dans le cadre du flux de travaux TrueDesign :

• Protéine TrueCut Cas9 v2, protéine TrueCut HiFi Cas9 ou ARNm GeneArt CRISPR
• Réactif de transfection CRISPRMAX ou réactif de transfection MessengerMAX