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Invitrogen™ SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit
Optimisé pour la synthèse d’ADNc premier brin directement à partir d’un lysat de cellules de mammifères sans avoir besoin d’isoler l’ARN au préalable. La lyse cellulaire et la transcription inverse sont effectuées dans le même tube et l’ADNc premier brin qui en résulte est prêt à être utilisé dans le clonage, la PCR et la qPCR.
Marque: Invitrogen™ 11750150
446.60 EUR valable jusqu'au 2024-12-20
Utilisez le code promo "21651" pour bénéficier de cette offre.
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Description
Caractéristiques du kit SuperScript™ IV :
- Compatible avec un large éventail de types de cellules de mammifères cultivés dans différentes conditions de traitement
- Le format à tube unique minimise la perte de réactifs, la perte d’échantillons et le temps de manipulation
- Le volume total de lysat peut être utilisé dans la réaction de synthèse d’ADNc premier brin, ce qui donne un plus grand rendement avec un nombre limité de cellules et permet la détection de transcrits rares
- ADNc de haute qualité généré pour une utilisation dans une variété d’applications, notamment le clonage, la PCR et la qPCR
- Le protocole simple dure environ 37 minutes
- Compatible avec les Master Mix TaqMan™ and SYBR Green qPCR de différents fabricants
- Performances optimisées pour 1 à 10 000 cellules par échantillon ; résultats équivalents à ceux de l’ARN purifié
Le kit de synthèse d’ADNc SuperScript™ IV CellsDirect comprend la transcriptase inverse SuperScript™ IV. Les caractéristiques de cette enzyme comprennent :
- Activité RNase H réduite
- Meilleure stabilité thermique
- Rendements élevés d’ADNc dans la réaction de synthèse premier brin, pour une sensibilité accrue et une détection accrue des transcrits rares
- Tolérance supérieure à divers inhibiteurs de la RT
La transcriptase inverse SuperScript™ IV est un choix idéal pour toutes les applications de RT-PCR et qRT-PCR. Il s’agit d’un mutant exclusif du virus de la leucémie murine de Moloney (M-MLV) avec une robustesse et une fiabilité élevées dans les réactions de transcription inverse. Il est significativement amélioré par rapport à la transcriptase inverse SuperScript™ III dans la résistance aux inhibiteurs, la processivité et la vitesse de réaction, tout en conservant tous les avantages de l’enzyme précédente, y compris une thermostabilité accrue, une synthèse d’ADNc pleine longueur hautement efficace et une activité d’ARNase réduite.
Fonctionnement
Dans la RT-PCR traditionnelle, l’ARN est d’abord isolé des cellules dans une procédure chronophage qui peut entraîner une perte de matériau. Grâce au kit de synthèse d’ADNc SuperScript™ IV CellsDirect, les cellules sont lysées et l’ADNc est généré à partir du lysat dans un tube unique avec une manipulation minimale et aucune perte d’échantillon. Le traitement par DNase I est une étape facultative qui peut être utilisée pour éliminer l’ADN génomique avant la synthèse premier brin. Ce kit a été optimisé pour les échantillons de petites cellules, allant de 10 000 cellules à une seule cellule.
Spécification
| • Solution de lyse SuperScript IV CellsDirect (2 x 1,25 ml) • Solution d’arrêt SuperScript IV CellsDirect (1 x 250 µl) • Activateur de lyse (1 x 25 µl) • DNase (1 x 55 µl) • Master Mix pour RT SuperScript IV (1 x 400 µl) • Contrôle sans RT SuperScript IV (1 x 400 µl) Conserver à –20°C. |
|
| Élevé | |
| Transcription inverse | |
| 50°C | |
| Réduction | |
| PCR en temps réel, PCR en temps réel (qPCR) | |
| 50 réactions | |
| Transcription inverse |
| Kit | |
| 10 min | |
| Moins dangereux, moins de déchets | |
| SuperScript IV | |
| Glace carbonique | |
| ADNc premier brin | |
| Composants prémélangés | |
| Cellules |