Master Mixes PCR en temps réel

Un mélange maître pour PCR en temps réel est une solution pré-préparée contenant la plupart des composants nécessaires à la réaction PCR, tels que l'ADN polymérase, les dNTPs, le MgCl2, le tampon, et parfois des colorants fluorescents, pour garantir la cohérence et l'efficacité du processus d'amplification.

Les composants d'un mélange maître pour RT-PCR incluent :

• ADN polymérase : Une enzyme pour synthétiser de nouveaux brins d'ADN.
• dNTPs (désoxynucléotides triphosphates) : Les blocs de construction pour la synthèse de nouveaux ADN.
• MgCl2 (chlorure de magnésium) : Un cofacteur nécessaire à l'activité de l'ADN polymérase.
• Tampon : Maintient les conditions optimales de pH et de sel pour la réaction.
• Colorant fluorescent (par exemple, SYBR Green ou sondes TaqMan) : Pour la détection en temps réel de l'amplification de l'ADN.
• Inhibiteur de RNase : Empêche la dégradation de l'ARN (si la transcription inverse est incluse).
• Transcriptase inverse : Enzyme pour synthétiser l'ADNc à partir de l'ARN (pour la RT-PCR).
• Amorces : Courtes séquences d'ADN qui initient la synthèse de l'ADN.

Ces composants sont combinés dans des proportions spécifiques pour assurer une amplification efficace et précise de l'ADN/ARN cible.

Lors de l'achat de mélanges maîtres pour RT-PCR, considérez les cinq facteurs suivants :

1. Assurez-vous que le mélange maître est compatible avec votre instrument de PCR en temps réel spécifique et vos applications.
2. Recherchez des mélanges offrant une haute sensibilité et spécificité pour détecter des cibles à faible abondance et distinguer entre des séquences similaires.
3. Vérifiez la stabilité et la durée de conservation pour garantir que le mélange reste efficace au fil du temps et dans des conditions de stockage.
4. Préférez des mélanges prêts à l'emploi qui minimisent les étapes de préparation, réduisant ainsi le risque d'erreurs.
5. Équilibrez le coût avec les caractéristiques de performance, en tenant compte de votre budget et de l'échelle de vos expériences.