PCR et qPCR
1. Préparation de l'échantillon
La préparation des échantillons pour la PCR ou la qPCR nécessite généralement l'extraction et la purification du matériel nucléaire. Selon la source de l'échantillon, cela peut impliquer une manipulation mécanique par homogénéisation ou nécessiter l'utilisation de résines ou de billes pour aider à lier les acides nucléiques avant la purification. Préparez vos échantillons à l'aide de kits d'extraction, d'isolation et de purification de l'ADN et de l'ARN, ainsi que de réactifs, de tampons, etc.
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2. Amplification PCR
L'amplification est réalisée en combinant un segment d'ADN, une polymérase, une solution de nucléotides et des amorces dans un tube PCR ou une microplaque. Un thermocycleur est utilisé pour effectuer les étapes suivantes, en répétant le processus 35 à 40 fois.
Dénaturation : Les liaisons hydrogène sont rompues, l'ADN se sépare.
Recuit : Les amorces et la polymérase se lient à l'ADN.
Extension : Les nucléotides s'associent à l'ADN pour former un nouveau brin complémentaire.
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3. Transcription inverse qPCR
Dans la PCR en temps réel, l'ARN est converti en ADNc, puis amplifié par PCR. Les applications courantes de la PCR en temps réel permettent de détecter les gènes exprimés, d'examiner les variantes de transcription et de créer des modèles d'ADNc pour les procédures de clonage et de séquençage. Vous trouverez ci-dessous des polymérases, des oligonucléotides, des mélanges maîtres et bien d'autres choses encore pour soutenir vos essais de PCR en temps réel.
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4. Quantification par qPCR
La PCR en temps réel est utilisée pour détecter des séquences d'ADN spécifiques. Cette méthode utilise des colorants ou des sondes fluorescents pour déterminer la quantité de matériel amplifié dans votre échantillon. Vous trouverez une variété de Master Mix, d'instruments de PCR en temps réel, de tests et de kits pour quantifier vos résultats de qPCR.
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5. Fournitures essentielles
Trouvez des enceintes PCR filtrées HEPA pour empêcher les particules contaminantes d'entrer dans votre espace de travail. Achetez des tubes PCR à usage unique et des barrettes de tubes, des microplaques d'acide nucléique, des enceintes PCR et d'autres articles de laboratoire certifiés exempts de DNAse, RNAse, ADN et d'autres contaminants potentiels.
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