Milieux de culture sélectifs et différentiels supplémentés
Les milieux de culture sélectifs et différentiels constituent un support idéal pour la croissance de nombreux types de cellules. Ils sont disponibles sous diverses formes, notamment sous forme liquide ou sèche.
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Questions fréquemment posées
Les milieux de culture sélectifs et différentiels courants sont :
- Gélose au mannitol salé (MSA) : Sélective en raison de sa forte concentration en NaCl pour les Staphylococcus. Différentielle car elle contient du mannitol et du rouge de phénol. La fermentation du mannitol fait virer le milieu au jaune.
- Gélose MacConkey : Sélective car elle contient des sels biliaires et du violet de cristal, qui inhibent la croissance des bactéries à Gram positif. Différentielle car elle contient du lactose et du rouge neutre. La fermentation du lactose fait apparaître une coloration rose/rouge.
- Gélose à l'éosine et au bleu de méthylène (EMB) : Sélective car elle contient de l'éosine Y et du bleu de méthylène, qui inhibent la croissance des bactéries à Gram positif. Différentielle car elle contient du lactose. La fermentation du lactose produit des colonies foncées avec un reflet vert métallique.
- Gélose entérique Hektoen (HE) : Sélective car elle contient des sels biliaires et des colorants qui inhibent la croissance des bactéries à Gram positif. Différentielle car elle contient du lactose, du saccharose, de la salicine et du citrate ferrique ammoniacal. La fermentation du lactose/saccharose donne une coloration jaune/saumon ; les producteurs de sulfure d'hydrogène forment des colonies noires.
- Gélose Xylose Lysine Désoxycholate (XLD) : Sélective car elle contient du désoxycholate de sodium, qui inhibe la croissance des bactéries à Gram positif. Différentielle car elle contient du xylose, de la lysine et du citrate ferrique ammoniacal. La fermentation du xylose donne une coloration jaune ; les producteurs de sulfure d'hydrogène forment des précipités noirs.
La gélose au mannitol salé (MSA) est considérée à la fois comme sélective et différentielle en raison de sa composition unique et de la manière dont elle interagit avec différents types de bactéries.
Propriétés sélectives :
- Forte concentration en chlorure de sodium (NaCl) : La MSA contient une forte concentration en chlorure de sodium, généralement comprise entre 7,5 et 10 %. Cette forte concentration en sel inhibe la croissance de la plupart des bactéries, mais permet la croissance des bactéries halotolérantes, en particulier des membres du genre Staphylococcus. Cela rend le milieu sélectif pour ces types de bactéries.
Propriétés différentielles :
- Mannitol et rouge de phénol : La MSA contient le sucre mannitol et l'indicateur de pH rouge de phénol. Lorsque des bactéries capables de fermenter le mannitol se développent sur la gélose, elles produisent des sous-produits acides. Le rouge de phénol présent dans le milieu détecte ce changement de pH.
- Fermentation du mannitol : Si la fermentation du mannitol a lieu, le rouge de phénol devient jaune en raison du milieu acide.
- Absence de fermentation du mannitol : Si le mannitol n'est pas fermenté, le rouge de phénol reste rouge ou devient rose en raison des sous-produits alcalins.
Lors du choix de milieux de culture sélectifs et différentiels supplémentaires, tenez compte des éléments suivants :
- Déterminez les types spécifiques de micro-organismes que vous souhaitez isoler et identifier. Différents milieux sont conçus pour sélectionner et différencier diverses bactéries, champignons ou autres micro-organismes.
- Évaluez les substances inhibitrices présentes dans le milieu. Ces substances sont essentielles pour supprimer la croissance des organismes non ciblés. Assurez-vous que les inhibiteurs sont adaptés aux micro-organismes que vous souhaitez exclure.
- Tenez compte des caractéristiques biochimiques ou physiologiques que le milieu permet de différencier. Cela implique souvent des propriétés métaboliques spécifiques, telles que la fermentation des glucides, l'activité enzymatique ou la production de certains pigments.
- Évaluez les composants nutritifs du milieu afin de vous assurer qu'ils favorisent la croissance des organismes ciblés.
- Vérifiez les systèmes indicateurs utilisés dans le milieu, tels que les indicateurs de pH, les substrats chromogènes ou les indicateurs d'oxydoréduction. Ces systèmes doivent fournir des résultats clairs et faciles à interpréter pour distinguer les différents types de micro-organismes.